Estudio de la actividad supresora de la proteína P0 de un aislamiento argentino del Potatoleafroll virus (PLRV).

BARRIOS BARÓN, MARÍA PILAR; AGROFOGLIO, YAMILA C.; DELFOSSE, VERÓNICA C.; NAHIRÑAK, VANESA; GONZALEZ DE URRETA, MARTIN; ALMASIA, NATALIA I.; VAZQUEZ ROVERE, CECILIA; DISTÉFANO, ANA J.

Buenos Aires

Congreso; XXXVI Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Virología; 2016

Sociedad Argentina de Virología

El Potato leafroll virus (PLRV), es la especie tipo del género Polerovirus de la familia Luteoviridae. Este virus causa una enfermedad de importanciaen el cultivo depapa, y se encuentra altamente distribuido alrededor del mundo. En Argentina, es una de las virosis importantes que en cultivares de papa susceptibles y con malas prácticas de manejo del cultivo, puede tener una incidencia del 20 al 30%. La actividad supresora de silenciamiento génico postranscripcional (PTGS) de la proteína P0 del PLRV ha sido caracterizada para varios aislamientos de diferentes regiones geográficas, observándose diferencias en su actividad. El objetivo del trabajo fue caracterizar la actividad supresora de la proteína P0 de un aislamiento argentino dePLRV (P0PLa).Para los ensayos de supresión del silenciamiento de RNA se utilizaron dos sistemasbasados en el silenciamiento de la proteína GFP, que permiten describir el mecanismo de acción y la etapa en la vía del silenciamiento que estaría afectada por el supresor. Las hojas de plantasde Nicotianabenthamianade la línea16C (que expresa constitutivamente GFP) fueron co-agroinfiltradas con una copia de GFP y la proteína P0PLa. Los patchs infiltrados se observaron de color verde fluorescente a los 5 días postinfiltración, indicando que P0PLa posee actividad de supresor de silenciamiento local. Además, P0PLa fue capaz de inhibir eficientemente el movimiento a larga distancia de la señal de silenciamiento, tal como se reportó para el aislamiento australiano de PLRV y diferente a lo reportado para el aislamiento francés.Para estudiar si la proteína P0PLa suprime el silenciamiento de RNA disparado por secuencias de RNA doble cadena (dsRNA), se infiltraron hojas de N. benthamiana con la proteína P0PLa, GFP y un inductor de dsRNA GFFG que deriva del gen GFP, observando nuevamente un fenotipo de supresión de silenciamiento.Los análisis realizados por NorthernBlot de los niveles de transcriptos de GFP y de RNAs pequeños interferentes (21-24 nt) específicos de GFP confirmaron la observación visual de que P0PLa tiene actividad de supresor de silenciamiento local y sistémico.