El trolox disminuye el porcentaje de espermatozoides precapacitados del semen porcino refrigerado

CAMPORINO, A.; CÓRDOBA, M.

CABA

Jornada; V Jornadas Internacionales INITRA; 2017

Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal (INITRA)

La conservación de gametas es una estrategia biotecnológica fundamental en el ámbito productivo. La evaluación del espermatozoide a través de sus aspectos funcionales aporta parámetros espermáticos que predicen la habilidad fertilizante. En los espermatozoides de porcinos la elevada concentración de ácidos grasos insaturados los hace más susceptibles a la peroxidación producida por las especies reactivas del oxígeno generadas durante el almacenamiento a bajas temperaturas que otras especies. El compuesto sintético derivado del alfa-tocoferol (vitamina E) denominado Trolox (ácido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2- carboxílico) tiene un efecto antioxidante que radica en su capacidad de secuestrar y romper enlaces de especies reactivas de oxígeno. El objetivo del presente trabajo es estudiar el efecto que tiene el Trolox sobre espermatozoides refrigerados de porcino. Se trabajó con un pool de muestras de semen que, tras ser incubado durante 20 minutos a 37ºC, fue separado en dos alícuotas iguales diluidas en medio Modena modificado, siendo una de ellas tratada con Trolox. La temperatura de ambas alícuotas se mantuvo a 25ºC durante 2 horas, para posteriormente ser almacenadas a 17°C. Al día 0 (semen fresco), 1, 2 y 5 de refrigeración se evaluó: viabilidad e integridad acrosomal con la tinción de azul tripán y microscopia óptica de Contraste Diferencial Interferencial (DIC), integridad funcional de la membrana plasmática con el Test Hipoosmótico (Hos Test), potencial de membrana mitocondrial con el fluorocromo JC-1 y estado de pre-capacitación con la tinción de Clorotetraciclina (CTC). El porcentaje de espermatozoides vivos en semen fresco fue de 76,33±5,85%. Las muestras refrigeradas sin Trolox presentaron un porcentaje de vitalidad de 57,00±11,02%, 44,8±6,87% y 38,5±8,06% al día 1, 2 y 5 post refrigeración respectivamente con diferencias significativas (p0,05). El potencial de membrana mitocondrial fue de 80,00±4,69% previo a la conservación. Las muestras tratadas con Trolox (69,00±7,75%, 58.75±6,80% y 46,33±12,66% al día 1, 2 y 5 respectivamente) presentaron un potencial de membrana mitocondrial mayor comparadas con las no tratadas (con un porcentaje de 61,50±6,60%, 53,67±2,08% y 34,67±19,22% al día 1, 2 y 5 respectivamente), siendo las diferencias significativas (p < 0,05). El efecto del antioxidante no produce cambios en el mantenimiento de un bajo potencial de membrana mitocondrial por lo cual relacionamos que la mejora de la viabilidad es ejercida por la disminución del estado redox intracelular. De esta manera el agregado de Trolox al diluyente mejora la calidad espermática obteniéndose un incremento en la viabilidad con menor porcentaje de espermatozoides precapacitados.