INVESTIGADORES
WEIGEL MUÑOZ Mariana
congresos y reuniones científicas
Título:
ASOCIACION DE GLIPR1L1/GLIPR1L2 AL ESPERMATOZOIDE Y SU PARTICIPACION EN EL PROCESO DE FERTILIZACIÓN
Autor/es:
ERNESTO JI;; CURIA A; M. WEIGEL MUÑOZ; COHEN D.J; CUASNICU P S
Reunión:
Jornada; PRIMER ENCUENTRO RIOPLATENSE DE BIOLOGIA - XIV JORNADAS ANUALES DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGÍA; 2012
Resumen:
En base a evidencias sugiriendo
la presencia de GLIPR1L1 y GLIPR1L2 en espermatozoides, investigamos su asociación
a la gameta, comportamiento durante la capacitación y rol en la fertilización. Estudios
de Western blot (Wb) e inmunofluorescencia
(IIF) utilizando anticuerpos contra GLIPR1L1 y GLIPR1L2 recombinantes generadas
en nuestro laboratorio confirmaron la presencia de ambas proteínas en
espermatozoides y revelaron su localización en la región dorsal de la cabeza de
espermatozoides vivos, y en cabeza y cola de células permeabilizadas. El
tratamiento de los espermatozoides con diferentes agentes mostró que NaCl (máx 2M) o DTT (250 uM) no fueron capaces
de removerlas de las células mientras que el Tritón X-100 (1%) extrajo completamente
ambas proteínas. La exposición a PNGasa-F y fosfolipasa-C reveló que ambas proteínas
estarían glicosiladas y que GLIPR1L1 se uniría por GPI. Ensayos de Wb e IIF
indicaron que GLIPR1L1 y GLIPR1L2 permanecen en los espermatozoides luego de la
capacitación y reacción acrosomal (RA) sin sufrir cambios post-traduccionales. Finalmente,
estudios de fertilización in vitro utilizando ovocitos con y sin zona pelucida
(ZP), mostraron que mientras los anticuerpos no fueron capaces de afectar la
fusión de gametas, lograron inhibir significativamente (p<0,05) la unión de
los espermatozoides a la ZP sin afectar su viabilidad, motilidad y RA. En
conjunto, estos resultados apoyan a GLIPR1L1 y GLIPR1L2 como dos nuevos
mediadores del proceso de fertilización.