EL MORÍN (2′,3,4′,5,7- PENTAHIDROXIFLAVONA) TIENE EFECTO SOBRE LA MADURACIÓN IN VITRO DE OVOCITOS PORCINOS

GHERSA, J; LORENZO, MS.; TEPLITZ, G.; LOMBARDO, DM.

CABA

Jornada; X JORNADAS DE JÓVENES INVESTIGADORES; 2021

Secretaría de Ciencia y Técnica FVET-UBA

El balance redox intra y extracelular en los ovocitos porcinos, modula la eficacia de lamaduración in vitro (MIV). Morín (2′,3,4′,5,7- Pentahidroxiflavona) es un flavonoide dela familia de las flavonas que elimina radicales libres y protegen del daño al ADN causadopor estos. Trabajos recientes sobre cultivos celulares demostraron que los efectos deMorín son dosis dependientes, a altas dosis estimula la producción de especies reactivasde oxígeno (ERO) para favorecer la apoptosis y a bajas dosis las elimina. El objetivo deltrabajo fue evaluar el efecto del agregado de distintas concentraciones de Morín en elmedio de maduración sobre la maduración nuclear y viabilidad ovocitaria. Se obtuvieroncomplejos cúmulus ovocito (COC) por aspiración folicular de ovarios a 30-37°Cprovenientes de cerdas faenadas en frigorífico. Se realizaron sucesivos lavados de losCOC en PBS con 10% de fluido folicular porcino (FFp). Para la MIV, se colocaron gruposde 50 COC por pocillo en 500 μL de medio y se cultivaron a 39°C en una atmósferasaturada de humedad, con 5 % de CO2. El control se maduró en medio base (medio 199Sigma® suplementado con 10% FFp, 2-mercaptoetanol, piruvato de sodio y antibióticos)y en los tratamientos se agregó 100 μM de Morín (tratamiento 1), 50 μM (tratamiento 2),10 μM (tratamiento 3) y 5 μM (tratamiento 4). Se realizó la MIV en 2 etapas de 22 h cadauna con cambio de medio. Solo en las primeras 22 h se agregó al medio hMG y dAMPc.Luego de la MIV se denudaron los ovocitos con hialuronidasa, se tiñeron con el colorantevital Azul Tripán 0,16% y se evaluó la viabilidad ovocitaria bajo lupa esteoreoscópica.Los ovocitos fueron fijados en paraformaldehído al 4%, teñidos con Hoechst 33342 ymontados sobre portaobjetos para ser observados con un microscopio de fluorescenciapara evaluar la maduración nuclear. El análisis estadístico se hizo mediante prueba de Chicuadrado. Ningún tratamiento produjo efecto sobre la viabilidad ovocitaria. Lostratamientos 1 y 2 afectaron negativamente la maduración (p valor < 0,05). Se deberáanalizar los cambios en el estado REDOX de los ovocitos para poder concluir sobre losefectos de Morín en el medio de maduración.