INVESTIGADORES
ALVAREZ analia
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de las proteinas corona en nanoparticulas de plata de sintesis biologica
Autor/es:
PATERLINI PAULA; ANA LEDESMA; ANALIA ALVAREZ; CINTIA MARIANA ROMERO
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; XXII Congreso de Fisico-quimica y quimica inorganica; 2021
Institución organizadora:
Universidad Nacional de La Plata
Resumen:
La nanobiosíntesis es una ?tecnología verde? mediante la cual se pueden obtener nanopartículas (NPs) por procesos biológicos tales como la reducción de una sal metálica por acción de biomoléculas. Estas biomoléculas pueden actuar como agentes reductores y/o estabilizadores para la formación de las NPs. Diversos microorganismos empleados en biorremediación han sido reconocidos como posibles nanofabricas. Especialmente las NPs de plata (AgNPs) tienen gran importancia en la biotecnología roja, debido a sus aplicaciones en medicina para el revelado de imágenes tumorales, liberación controlada de drogas y excelentes propiedades antimicrobianas.Los objetivos del presente trabajo fueron caracterizar, evaluar la actividad biológica e identificar el contenido proteico involucrado en la síntesis y estabilidad de AgNPs producidas por la actinobacteria Streptomyces sp. M7. Streptomyces sp. M7 [1] fue cultivada en medio TSB con agitación, 72 hs. Las células separadas del sobrenadante por centrifugación, fueron inoculadas (10 gL-1) en agua destilada e incubadas con agitación, 72 hs. Mediante centrifugación se recuperó el sobrenadante (fuente de biomoléculas reductoras) con el que se prepararon soluciones de AgNO3 de 0,5 y 1 mM, por triplicado. Las soluciones se incubaron con agitación, 120 hs y se tomaron muestras cada 24 hs, realizando los controles apropiados. Se evaluó la biosíntesis de AgNPs por medición de absorbancia (200 a 800 nm) y por microscopia electrónica de barrido (MEB). La composición elemental de las AgNPS se determinó mediante Espectroscopia de Energía Dispersada (EDS) y Espectroscopia Infrarroja por Trasformada de Fourier (FTIR). La estabilidad térmica se evaluó mediante Termogravimetría (TGA). Las NPs obtenidas se concentraron y se sembraron en geles SDS-PAGE revelados con Coomassie coloidal. Las bandas de proteínas fueron caracterizadas por Espectrometría de Masas utilizando MALDI-TOF-MS. Finalmente se evaluó la actividad antimicrobiana de las AgNPs frente a cepas de Cándida sp. patógenas.La muestra tomada a las 120 hs, AgNO3 1 mM presentó el pico más alto de absorbancia a los 420 nm, (DO: 1,48 ± 0,32) en comparación a las demás muestras, coincidiendo con la absorbancia reportada para AgNPs. Resultados similares fueron reportados por Abdel-Hadi, et al. (2014) para AgNPs sintetizadas a partir del hongo Aspergillus terreus. Las imágenes de MEB revelaron la presencia de NPs agregadas, de tamaño heterogéneo entre 17,71 nm y 94,44 nm. El espectro EDS presentó una fuerte señal para Ag y otros picos más débiles correspondientes a otros elementos. El espectro FTIR presentó picos a 1420 y 3400 cm-1 previamente reportado por otros autores para AgNPs (Aguilar Méndez, et al., 2010; Gopinath, et al., 2012). Se observó un pico cercano a 1650 cm -1 que podría asociarse a la presencia de grupos Amida I presentes en proteínas. El estudio de TGA mostró 5 etapas de pérdida de masa (3 picos pronunciados entre los 100 y 300 °C, un pico suave a los 400 °C y un pico intenso a los 550 °C). El estudio proteómico permitió identificar numerosas proteínas asociadas a las NPs, destacándose las de tipo óxido-reductasas por su potencial rol en la biosíntesis de NPs, y sus reconocidas funciones en el metabolismo de esta bacteria metalo-resistente. Finalmente, la evaluación de la actividad biológica permitió sugerir a las AgNPs producidas por Streptomyces sp. M7 como un potencial nuevo agente antimicrobiano debido a su efecto sobre cepas de Candida sp. Diferentes autores han reportado el efecto antimicrobiano de las AgNPs frente a hongos filamentosos, levaduras y bacterias (Aguilar Méndez et al. 2011; Saxena, et al. 2016).