INVESTIGADORES
COSTAS Monica Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
La inducción de senescencia podría involucrar cambios en la expresión de coactivadores que participan en el desarrollo tumoral
Autor/es:
RUIZ GRECCO M; RUBIO M F; FERNANDEZ LARROSA P N; ALVARADO C; MICENMACHER S; COSTAS M A
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires
Reunión:
Congreso; SAIC 2009; 2009
Resumen:
La senescencia celular es un proceso genéticamente controlado
que involucra el arresto irreversible del ciclo celular y puede
ocurrir por dos mecanismos: acortamiento de telómeros o acumulación
de daños genómicos a lo largo del tiempo. En las células
senescentes se produce un cambio de la expresión génica
acompañado de cambios en la heterocromatinización que pueden
favorecer el desarrollo tumoral. RAC3 es un coactivador de
receptores nucleares y de NF-kB, que interviene en el
remodelado de la cromatina y contribuye al desarrollo tumoral.
Se quiso determinar si los niveles de expresión de RAC3 son
regulados diferencialmente en células senescentes. Para ésto se
trabajó sobre un modelo de células normales WI38 y dos estímulos
inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
Se quiso determinar si los niveles de expresión de RAC3 son
regulados diferencialmente en células senescentes. Para ésto se
trabajó sobre un modelo de células normales WI38 y dos estímulos
inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.kB, que interviene en el
remodelado de la cromatina y contribuye al desarrollo tumoral.
Se quiso determinar si los niveles de expresión de RAC3 son
regulados diferencialmente en células senescentes. Para ésto se
trabajó sobre un modelo de células normales WI38 y dos estímulos
inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
Se quiso determinar si los niveles de expresión de RAC3 son
regulados diferencialmente en células senescentes. Para ésto se
trabajó sobre un modelo de células normales WI38 y dos estímulos
inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó
arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento
frente a estos estímulos. Se observó por microscopia
de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño
nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días
postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot
que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva
por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs
luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles
de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con
Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una
disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores
a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.
24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con
Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución
de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia
y su posible participación en los cambios de heterocromatinización,
contrariamente a la sobreexpresión descripta en las
células tumorales.