INVESTIGADORES
DEWEY Ricardo Alfredo
congresos y reuniones científicas
Título:
EFECTO DE TGFß1, DE DISTINTOS SUEROS Y DE VECTORES LENTIVIRALES SOBRE LA EXPRESIÓN DE CITOQUINAS ESTIMULANTES DE LA HEMATOPOYESIS, EN CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES HUMANAS DERIVADAS DE TEJIDO ADIPOSO
Autor/es:
T. M. RODRÍGUEZ; A. CARREA; A. SALDÍAS; M. IRIGO; R. GALLO; M. J. PERONE; R. A. DEWEY
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011
Resumen:
Las células madre hematopoyéticas (HSCs) poseen un gran potencial terapéutico, aunque su cultivo ex vivo
requiere de citoquinas que favorezcan su proliferación. Una de las
estrategias para expandir HSCs se basa en el cocultivo de éstas con
células madre mesenquimales provenientes del tejido adiposo (ASC).
Estas, secretan citoquinas hematopoyéticas (CH) que contribuyen a la
multiplicación de las HSCs. Se sabe que TGFβ1, secretado por la mayoría
de las células, inhibe la multiplicación de HSC mediante la disminución
de factores de crecimiento hematopoyético. Aquí estudiamos en ASCs el
efecto de distintos sueros, tales como suero humano (HS), suero bovino
fetal (FBS) y seroalbúmina bovina (BSA), en presencia de TGFß1, sobre la
expresión de un panel de CH formado por TPO, SCF, Flt3-ligand (FL),
IL-6, IL-3, G-CSF, LIF y GM-CSF, mediante PCR cuantitativa. Por último,
analizamos el efecto de la modificación genética con vectores
lentivirales, sobre el mismo panel de CH, en presencia y ausencia de
TGFß1. Para ello, utilizando un vector lentiviral que codifica para la
proteína GFP, se transdujeron ASCs. De esta manera pudimos documentar
que los patrones de expresión de las citoquinas en estudio varían
significativamente en presencia de los distintos sueros (p<0.01),
siendo BSA la mejor condición encontrada. Además en ASC, TGFβ1 modula la
expresión de varias de las CH analizadas (p<0.01), mientras que la
expresión de otras parece no ser alterada. Por último observamos que, la
modificación genética de ASCs con vectores lentivirales, altera
significativamente (p<0.01) los niveles de expresión de los genes
analizados. En conclusión, pudimos establecer el efecto de TGFß1 sobre
la expresión de CH en ASCs, y que la modificación genética con vectores
lentivirales altera los patrones de secreción de citoquinas de modo no
deseado. El estudio de los factores solubles y de las células presentes
en el microambiente permitirá desarrollar sistemas más efectivos de
expansión de HSC.