DIFERENCIAS EN LA EXPRESIÓN GÉNICA ENDOMETRIAL ENTRE VACAS HOLSTEIN SUBFÉRTILES Y FÉRTILES

JAUREGUIBERRY, MARÍA; MADOZ, LAURA VANINA; QUINTANA, SILVINA; BURUCÚA, MERCEDES; MARIN, MAIA; TIZZIANO, MARCO; PECORARO, MARCELO; DE LA SOTA, RODOLFO

Córdoba

Simposio; 12° Simposio Internacional de Reproducción Animal; 2017

INSTITUTO DE REPRODUCCION ANIMAL CORDOBA

Las alteraciones del ambiente uterino producidas por cambios en la expresión génica endometrial,podrían ser responsables de la disminución de la fertilidad en vacas subfértiles como lo son las vacasrepetidoras (VR). Dentro de los factores de crecimiento y enzimas que se relacionan con lareceptividad uterina, crecimiento embrionario e implantación se encuentran el factor de crecimientoepidérmico (EGF), el factor nodal (FNod) y la enzima prostaglandina-endoperóxido sintasa 2(PTGS2). Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo es comparar la expresión endometrial de ARNmdel receptor de EGF (EGFR), FNod y PTGS2 a partir de muestras provenientes de VR o vacas fértiles(CF, vacas preñadas dentro de las primeras 2 IA posparto), sin endometritis subclínica (ES) duranteel diestro. Para la realización de este experimento se tomaron dos cepillados endometriales de cadaVR (n= 16) y CF (n= 9) mediante la técnica de cytobrush. Parte del material obtenido de uno de loscepillos se utilizó para el diagnóstico de ES (≥5% de neutrófilos). Posteriormente, el material restantejunto con el material del segundo cepillo, se descargaron en un tubo eppendorf que contenía 1 ul deestabilizador de ARN (RNA later, Qiagen) para el estudio de expresión génica a través de RT-PCR entiempo real. Estas muestras se almacenaron a -20°C hasta su procesamiento. Además, se tomó unamuestra de sangre para medir las concentraciones de progesterona (P4) e incluir solamente las vacasque se encontraban en diestro (≥1 ng/ml P4). Se extrajo ARN de todas las muestras mediante Trizol,y se generó ADNc. Para la determinación de los niveles relativos de expresión de cada marcador seaplicó el método ddCt., como gen de referencia se utilizó la enzima gliceraldehído-3 fosfatodeshidrogenasa y como calibrador se utilizaron muestras de vacas en anestro. El análisis arrojódiferencias significativas entre los grupos experimentales en la expresión de ARNm de los trestranscriptos estudiados. En cuanto al EGFR, la expresión génica fue mayor en VR que en CF(P˂0.05). Esta diferencia podría relacionarse con la alteración de los mecanismos que regulan laexpresión de este receptor, en este caso podrían estar alteradas las concentraciones de las hormonasesteroideas o la de su ligando, el EGF, cuya concentración se ve disminuida en un 70% de las VRsegún Katagiri y Takahashi (2006). En cuanto al FNod, la expresión génica fue mayor en VR que enCF (P