Expresión de Interferón Lambda en Tejido Nervioso de Bovinos Infectados con BoHV-1 o BoHV-5

ROSALES, JUAN JOSÉ; BURUCÚA, MERCEDES; ODEÓN, ANSELMO; MARIN, MAIA; PÉREZ, SANDRA

Valle Hermoso, Córdoba

Congreso; XXXVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2018

Sociedad Argentina de Virología división de la Asociación Argentina de Microbiología

Los alfaherpesvirus bovinos (BoHV) tipo 1 y 5 sonneuroinvasivos. El BoHV-5 es el agente causal demeningoencefalitis necrotizante en terneros, mientrasque el BoHV-1 solo ocasionalmente se lo asocia concuadros neurológicos. El ciclo de infección de losalfaherpesvirus se caracteriza por etapas de infecciónaguda, latencia y reactivación. Las neuronassensoriales del ganglio trigémino (GT) son el principalsitio de latencia y la reactivación del virus latenteconduce a la transmisión y diseminación viral. Elinterferón (IFN) tipo III o IFNλ es un grupo de IFNsrecientemente identificados. Los receptores para estacitoquina se localizan en células epiteliales y delsistema inmune, aunque su localización en otrostejidos no ha sido extensamente investigada. Al igualque el IFN tipo I, el IFNλ induce un estado antiviral enlas células. Si bien el rol del IFN tipo I en la infecciónpor BoHV ha sido parcialmente estudiado, no existeinformación respecto al IFN tipo III. El objetivo de esteestudio fue determinar y comparar los niveles deexpresión del IFNλ3 en sistema nervioso central (SNC)y GT durante la infección aguda de ternerosexperimentalmente infectados con BoHV-1 o 5.Materiales y Métodos: Se utilizaron terneros de 1 añode edad inoculados intranasalmente con 106.3DICC50/ml de la cepa Cooper de BoHV-1(n=2) o de lacepa 97/613 de BoHV-5 (n=2). La eutanasia se realizó alos 6 días post-infección (dpi) y se obtuvieron muestrasde corteza olfatoria, frontal y posterior, médulaoblonga y GT. El ARN se extrajo con Trizol (Invitrogen)y fue cuantificado con un Nanodrop. El ADN genómicose digirió con DNase I (Ambion), se transcribió a cDNA(RT, Applied Biosystems) y la expresión del gen IFNλ3se cuantificó con la técnica RT-qPCR empleando laMASTER MIX Sybr/ROX(PB-L), siguiendo lasindicaciones de cada fabricante. Resultados: Losniveles de expresión de IFNλ3 fueronsignificativamente superiores (p≤0,05) en GT de losterneros infectados con BoHV-1 y 5 con respecto a losniveles observados en el control. En este tejido, losniveles de expresión en la infección por BoHV-1 fueron5,5 veces superiores a los detectados para BoHV-5. Porotro lado, en corteza olfatoria y corteza frontal sólo enla infección por BoHV-5 los niveles de expresión fueronsignificativamente superiores (p≤0,05) a losdetectados en el control. Conclusión: La cortezaolfatoria y frontal son los sitios preferenciales dereplicación del BoHV-5 al acceder al SNC, por lo cual loselevados niveles de expresión de IFNλ3 secorresponden con la respuesta esperada a lareplicación del virus en estas áreas del cerebro. Delmismo modo, es probable que la respuesta a IFNλ3 enGT de los animales infectados con BoHV-1 refleje losmayores niveles de replicación viral descriptos en estesitio durante la infección aguda. Aunque se requierenestudios más profundos, estos resultados son losprimeros reportes de la expresión de IFNλ3 en tejidonervioso de bovinos infectados con alfaherpesvirus.