Acumulación de polihidroxialcanoatos en Pseudomonas putida en respuesta al estrés generado por detergentes cationicos

HEREDIA, ROMINA M.; BOERIS PS.; LÓPEZ NI; LUCCHESI GI

Congreso; XXII jornadas Científicas Sociedad Biología de Córdoba.; 2019

La síntesis y degradación de polihidroxialcanoatos (PHAs) es una de las estrategias utilizadas por las bacterias para tolerar situaciones ambientales adversas. Estos polímeros se almacenan intracelularmente y, cuando la fuente de carbono externa se agota, son depolimerizados y utilizados como fuente de carbono y energía. La presencia de contaminantes ambientales, entre ellos los detergentes catiónicos, generan un desbalance en la relación C/N que podría llevar a que algunos microorganismos acumulen gránulos de PHAs como reserva. Células de Pseudomonas putida A (ATCC 12633) crecidas en presencia de 50 mg/l del detergente catiónico Br-tetradeciltrimetilamonio (TDTMA) presentaron en su citoplasma celular zonas claras y bien delimitadas que fueron identificadas como gránulos de PHAs mediante tinción con el colorante fluorescente Nile Blue A. La producción del polímero en función del tiempo de cultivo se analizó durante 7 días por espectroscopía de fluorescencia y citometría de flujo. El mayor porcentaje de acumulación se evidenció a las 48 h de cultivo (30% del peso seco celular), y, a partir de ese tiempo, la intensidad de fluorescencia disminuyó paulatinamente, indicando la depolimerización del mismo. Acompañando este comportamiento, el número de células viables se mantuvo, prácticamente constante, durante todo el tiempo de cultivo (1,4 x10 8 UFC/ml). En estas mismas condiciones de cultivo, la caracterización por cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masa mostró que P. putida acumula PHAs de longitud de cadena media constituido principalmente por 3-hidroxidecanoato (65 %), 3-hidroxitetradecanoato (15 %), 3-hidroxioctanoato (12 %) y 3-hidroxidodecanoato (8 %). La composición del biopolímero sugiere una estrecha relación entre la producción de ácido tetradecanoico, producto del metabolismo del detergente TDTMA, y la síntesis de biopolímero. En su conjunto, los resultados evidenciaron la capacidad de P. putida para acumular PHAs a partir de la degradación del contaminante biogénico TDTMA y muestran que la movilización de PHAs sería uno de los mecanismos que contribuye a la sobrevida y adaptación de P. putida ante condiciones de estrés dadas por la presencia de detergentes catiónicos.