NUEVO SISTEMA PARA DESPLEGAR AL FACTOR VON WILLEBRAND FAVORECIENDO LA ACCION DE LA PROTEASA QUE CLIVA AL FACTOR VON WILLEBRAND

KEMPFER, ANA C; FARÍAS, CRISTINA; CARBALLO GONZALO A; SILAF MARÍA R; AMARAL MARÍA M; LAZZARI MARÍA A

Mar del Plata

Congreso; SAIC Sociedad Argentina de Investigación Clínica XLV Reunión Científica SAI Sociedad Argentina de Inmunología XLVIII Reunión Científica; 2000

SAIC-SAI

Previamente hemos reportado una sustancia (proteasa) que cliva al factor von Willebrand (vWf) en las condiciones de la microcirculación. Se ha encontrado que esta proteasa está ausente ó disminuída en pacientes con púrpura trombocitopénica trombótica familiar (PTT) (deficiencia en la síntesis) ó no familiar (inhibidor). Existen dos mecanismos para desplegar el vWf (forma sobre la que actúa la proteasa): perfusión de las muestras a alta fuerza de cizallamiento (A) y siembra de las muestras sobre filtros de nitrocelulosa suspendidos en una solución de urea (B). Nuestro objetivo fue, utilizando el mecanismo B, hallar un sistema más simple en el cual la muestra interactúe con urea y para que la obtención del producto sea infalible. Las muestras se colocaron en membranas de diálisis (B1). La incubación en la solución de urea se realizó durante 24 h. a 37 ºC. Se desarrollaron curvas con muestras ultrasonicadas de 6 normales diluídos de 1/5 a 1/40 y una muestra de un paciente con PTT no familiar ultrasonicado diluído 1/5, a las que se les agregó vWf purificado. La desaparición de los multímeros de vWf es un índice de la actividad proteásica. Utilizando B1 se obtuvieron perfiles multiméricos similares a B para las diluciones de las curvas de los normales y del paciente. La actividad proteásica del paciente (25%) fue similar en A, B y B1 (n=4). El sistema utilizado es tan adecuado como A y B