La histamina promueve la producción de IL-12 y activa respuestas citotóxicas al actuar sobre las células dendríticas: Rol de los microambientes ácidos

AMARAL MARÍA M; ALVAREZ CAROLINA; BORGE M; NANNINI P; GABELLONI ML; FUXMAN BASS JI; MORANDE P; GALLETTI J; GEFFNER JORGE; VERMEULEN MÓNICA

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología.

La histamina (HIS) es una amina vasoactiva liberada por los mastocitos y basófilos durante los procesos inflamatorios e infecciosos, con capacidad de modular la funcionalidad de las células dendríticas (CD). Previamente, demostramos que la HIS promueve el aumento en la producción de IL-12 por CD murinas expuestas a pH 6,5, actuando a través del receptor H1R. El objetivo de este trabajo consistió en estudiar mediante qué receptor la histamina modulaba esta función. Las CD se obtuvieron de precursores de médula ósea de ratones C57BL/6 cultivados con GM-CSF. Primero, realizamos una cuantificación relativa de los niveles de expresión de los RNAm del H3R y H4R mediante una PCR en tiempo real. Las CD se incubaron con medio a pH 7,3 o pH 6,5 durante 1h a 37ºC, y se trataron o no con HIS (0,1μM) por 30 min. Encontramos que la HIS indujo un aumento de la expresión del RNAm del H3R en las CD expuestas a pH 6,5, sin afectar la del H4R. Luego estudiamos la producción de IL-12 por marcación intracitoplasmática y citometría de flujo. Las CD se pre-incubaron o no durante 10 min con tioperamida: Ti (100 μM), antagonista del H3R/H4R, y posteriormente se trataron con HIS. Observamos una disminución del 20% en la producción de IL-12, en CD expuestas a pH 6,5 y tratadas con Ti previa incubación con HIS: media (% de células positivas ± ES) (n=7; p≤0.05)= pH 6,5, 30 ± 5; pH 6,5 + HIS, 46 ± 5; pH 6,5 + HIS + Ti, 32 ± 6. Finalmente estudiamos la inducción de respuestas citotóxicas, usualmente asociadas a la producción de esta citoquina. Notablemente, en ese microambiente ácido, la HIS aumentó la capacidad citolítica de las CD: media (cpm ± ES)(n=4; p≤0.05) pH 7.3, 19,2 ± 4.3; pH 7.3 + HIS, 29 ± 3; pH 6.5, 27 ± 1,5, pH 6.5 + HIS, 44 ± 4,5. Estos resultados indicarían que bajo la influencia de microambientes de etiología ácida, como los observados en los procesos asmáticos, la HIS desencadenaría la activación de respuestas Th1 a través del incremento en la liberación de IL-12 por CD.