ELEVACION DE LA PRESION ARTERIAL (PA)EN UN MODELO DE RATON TRANSGENICO CON SOBREEXPRESION DE TIROLIBERINA (TRH)

MARIA S. LANDA, SILVIA I. GARCÍA, MARIANO SCHUMAN, ADRIANA BURGUEÑO, CAROLINA GEMA, AZUCENA L. ALVAREZ, CARLOS J. PIROLA

Mar del PLata

Congreso; XLIX Reunión Anual de la sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La TRH diencefálica (TRHd) regula la PA. Demostramos que la rata espontáneamente hipertensa muestra una hiperactividad pre y postsinaptica de la TRHd que puede revertirse por tratamiento antisense contra la TRH(AS). La sobreexpresión temporal de TRH con un plásmido de expresión eucariota produce elevación de la PA que puede revertirse con el AS y que no depende de la angiotensina II central ni del estado tiroideo. Así, postulamos que la sobreexpresión permanente de TRHd en un animal transgénico (Tg) debería conducir a elevación de la PA en forma estable. Desarrollamos ratones transgénicos mediante la inyección de una construcción génica conteniendo el cDNA del precursor de la TRH bajo la acción del promotor fuerte del CMV y con la señal de poliadenilación de la bGH. Se obtuvieron 11 fundadores que mostraron en conjunto una significativa elevación (p<0.02, ANOVA con medidas repetidas) elevación de la PA sistólica (PAS, método pletismográfico de la cola) con respecto a la cepa original C57BL (media±ES; C57:98±2.1 vs Tg: 109±2.1). Los 5 con una elevación mayor de la PAS (cepa 6954, 6948, 7061, 6959 y 7149) fueron cruzados con la cepa original C57 para obtener la F1. Se muestran resultados de la F1 de las 3 primeras cepas. Los animales de la F1 de las cepas 6954, 6948 y 7061 no mostraron diferencias en los niveles de T3 y T4 (tabla). Como era de esperarse mediante un ensayo de protección de la Ribonucleasa, los Tg presentaron una elevación marcada de la abundancia del mRNA del preTRH (tabla) y al mismo tiempo, una elevación significativa (p<0.01, ANOVA) de la PAS (tabla). CEPAS N T4, ug/ml T3, ng/ml TRHdmRNA/ GADPHmRNA PAS, mmHg C57 8 6.0±0.5 2.6±0.4 0.37±0.10 87±3 6948 9 6.7±0.4 3.1±0.3 0.87±0.49* 108±2* 6954 19 7.5±0.3 3.1±0.2 1.04±0.47* 112±2* 7061 8 6.0±0.5 2.4±0.4 1.49±0.50* 110±2* Resultados se expresan como media±DS, *: p<0.01 con respecto a la cepa control C57BL (C57). La estrategia, aunque simple en su diseño ya que la construcción no es regulable ni tejido específica permitió la obtención de animales que sobreexpresan TRH en los tejidos que poseen la vía biosintética adecuada para el procesamiento del precursor, diencéfalo y corazón principalmente (resultados no mostrados). La abundante expresión del mRNA del preTRH en diencéfalo se acompañó con una elevación significativa de la PAS como era esperado.