Estudio de la apoptosis inducida por el virus de la bursitis infecciosa, el rol de la proteína no estructural vp5 en este proceso y su localización subcelular

CARBALLEDA, J.M.; MARONICHE, G.; CHIMENO ZOTH, S.; LUCERO, S.; RICHETTA, M.; GÓMEZ, E.; GRAVISACO, M.J.; BERINSTEIN, A.

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología y II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

El virus de la bursitis infecciosa (IBDV) pertenece a la familia Birnaviridae. Es un virus desnudo y su cápside posee geometría icosaédrica . Provoca inmunosupresión en pollos, sobre todo jóvenes. Posee un genoma de ARN doble cadena bisegmentado. El segmento pequeño codifica para una ARN polimerasa dependiente de ARN, la proteína VP1, mientras que el segmento mayor codifica para las proteínas de cápside VP2, VP3 y la proteasa viral VP4. Un marco de lectura superpuesto codifica para la proteína VP5 cuyo rol respecto a la apoptosis es muy discutido. En cuanto a su localización, por métodos bioinformáticos, se ha señalado que es una proteína de transmembrana que exhibe hacia el espacio extracelular la región C-terminal. El objetivo del presente trabajo fue determinar la capacidad de IBDV de inducir apoptosis en distintos tipos celulares y determinar el papel de VP5 en este proceso. Por otro lado, fue objetivo también ampliar los conocimientos acerca de la localización subcelular de esta proteína a través de distintos programas bioinformáticos y del análisis in vivo en células transfectadas con fusiones de genes de proteínas fluorescentes al gen de VP5. Los resultados obtenidos demostraron que si bien IBDV es capaz de inducir apoptosis tanto en la bursa de Fabricio (órgano blanco del virus) de animales inoculados como en células provenientes de fibroblastos de ave, no es capaz de hacerlo en la línea celular DT-40, derivada de linfocitos B de pollo. Incluso en esta última, la infección con IBDV reduce la activación del efector apoptótico Caspasa 3. Asimismo, VP5 es capaz de reducir la cantidad de mensajero de Caspasa 3 en células transfectadas. Respecto a su localización subcelular, al utilizar diferentes programas disponibles para el análisis in silico, observamos discrepancias entre los resultados obtenidos, no pudiendo caracterizar a VP5 consistentemente por esta metodología. Sin embargo, mediante estudios in vivo logramos determinar que VP5, si bien se encuentra en la membrana plasmática de las células transfectadas, no es una proteína de transmembrana ya que no expone ningún dominio hacia el exterior de la célula.