Estudio de la respuesta inmune contra IBDV en pollos

JUAN MANUEL CARBALLEDA; SILVINA CHIMENO ZOTH; EVANGELINA GÓMEZ; MARÍA J. GRAVISACO; A. BERINSTEIN

Jornada; XXX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2010

El virus de la bursitis infecciosa (IBDV)  es un importante patógeno aviar debido a que causa una profunda inmunosupresión en animales infectados. Se conocen dos serotipos de este birnavirus: 1 y 2. El serotipo 2 es avirulento para pollos, mientras que el 1 presenta diferentes grados de virulencia que van desde avirulento hasta altamente virulento. Las vacunas comerciales, a virus vivo, utilizadas en la actualidad se basan en variantes de virulencia intermedia del serotipo 1. El estudio de la respuesta inmune a partir de la expresión de proteínas relacionadas con el sistema inmune y las poblaciones celulares involucradas, constituye una herramienta útil para analizar la relación hospedador-patógeno y, a futuro, permitiría imitar dicha respuesta en formulaciones vacunales de nueva generación. En este trabajo, se inocularon pollos SPF de 21 días de edad con 200ul de una cepa vacunal de IBDV (106DI50/ml) ) por vía intramuscular o por vía oral. A 1, 3 y 5 días post inoculación (DPI) 3 animales por grupo fueron sangrados y sacrificados. Se extrajeron pequeñas piezas de bazo, duodeno y bursa de Fabricio, de las cuales se obtuvo el ARN para cuantificar ARNm de diferentes citoquinas. Los  bazos y las bursas de los animales de cada grupo fueron agrupados y se extrajeron los linfocitos mediante gradientes de densidad, con el objeto de cuantificar poblaciones celulares mediante citometría de flujo y la producción de nitrito por parte de los macrófagos. Tres animales por grupo fueron sangrados semanalmente durante 5 semanas a fin de cuantificar anticuerpos específicos anti IBDV. Los animales inoculados por vía intramuscular mostraron una sobreexpresión de INFg a 1DPI en duodeno y a nivel sistémico. Los macrófagos de bazo de los animales tratados mostraron mayor producción de nitrito que los animales control en este tiempo, y en este órgano la citoquina proinflamatoria IL-6 se vió sobreexpresada. A 3DPI, el INFg continuaba, aunque en menor medida, sobreexpresado en duodeno y se vió sobreexpresado en  bazo. Sin embargo, a nivel sistémico no se encontraron niveles detectables de INFg. A este tiempo y a 5DPI los macrófagos provenientes del bazo de animales tratados mostraron menor capacidad de producción de nitrito que los provenientes de animales control, lo que sugiere una caída en la población de macrófagos, dato que fue corroborado por citometría de flujo. La inoculación de IBDV por vía oral produjo una leve sobreexpresión de INFg en bazo y a nivel sistémico a 1DPI. A 3DPI, el nivel sistémico de esta citoquina fue más elevado. En ese sentido, los macrófagos de bazo de animales tratados mostraron mayor producción de nitrito a 1 y 3DPI. Asimismo, se observó una fuerte sobreexpresión de IL-6 (250 veces) en bursa de Fabricio a 3DPI, la que continuó a 5DPI. Los resultados, en suma, mostraron que la cepa vacunal de IBDV administrada por ambas vías de inoculación provocó una fuerte respuesta inmune inflamatoria, siendo más fuerte a 1DPI en la vía intramuscular y a 3DPI  en la vía oral.  Además, la disminución de la población de macrófagos y de la capacidad de producción de nitrito en bazo, provocado por la administración intramuscular de IBDV, sugieren un daño específico de IBDV sobre este tipo celular.