Efecto de la patogenicidad viral en la expresión de genes realacionados a la apoptosis

COLINA S ; NOGUEIRAS J; ABEYA M; M. SERENA; ECHEVERRIA M. G; G. METZ

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM 2019); 2019

Muerte celular programada: Apoptosis. La apoptosis se considera vital para varios procesos fisiológicos normales de las células, es así que ocurre durante el desarrollo y el envejecimiento de un organismo como un mecanismo para mantener las poblaciones celulares; además juega un rol importante en la defensa ante agente externos desconocidos (1, 2). Al caracterizarse por unas serie de cambios morfológicos y moleculares típicos que suceden de manera ordenada, se descubrió que es llevada a cabo por un estricto programa celular. Las Caspasas son las proteasas responsables de la apoptosis y estas, junto a una gran familia de otras proteínas específicas, controlan la vida y muerte de una célula a través de dos vías principales; la vía intrínseca y la extrínseca.Virus de Arteritis Equina. El virus de arteritis equina (VAE) es el responsable de la enfermedad Arteritis Viral Equina que puede afectar gravemente a los equinos infectados. Diversos estudios han demostrado que la infección in vitro de este virus genera una activación del proceso apoptótico sobre las células que infecta (3). Las infecciones in vivo del VAE generan lisis de las pequeñas arteriolas y vénulas de los animales que infectan, este signo clínico característico podría ser consecuencia de la inducción de la apoptosis (4). Objetivo del trabajo. El objetivo del trabajo fue analizar si existen diferencias morfológicas y moleculares asociados a la apoptosis en cultivos de células BHK-21 infectados con una cepa patogénica (Bucyrus) y otra no patogénica (LP01) del VAE. Discusión y conclusión. En nuestro trabajo de investigación se pudo evidenciar cambios morfológicos asociados a la apoptosis en los cultivos celulares infectados con ambas cepas. Pero debido a que la técnica es de carácter cualitativa, no es posible observar diferencias a nivel molecular.Con la técnica de citometría de flujo, al ser de carácter cuantitativa, se pudo aseverar que existía un mayor porcentaje de células apoptóticas en los cultivos infectados con la cepa patogénica.Por otra parte la técnica de qPCR fue realizada para la expresión del gen de la caspasa-3 a las 24 y 48hpi; los datos preliminares mostraron un aumento en la expresión de este gen en ambos cultivos a las 24hpi respecto al control de β-actina. Sin embargo, con el método del doble delta Ct, se observó un aumento mucho mayor con la cepa no patogénica, por lo que restaría analizar la participación de las caspasas 8 y 9 en el proceso apoptótico inducido por ambas cepas.