Regulación de los ARFs mediada por tasiRNAs y su participación en el desarrollo de órganos laterales en plantas leguminosas

KIROLINKO, CRISTINA; BLANCO, FLAVIO; ZANETTI, MARÍA EUGENIA; HOBECKER, KAREN

Workshop; Biología Celular y Molecular del RNA Workshop; 2018

Los factores de transcripción ARF2, ARF3 y ARF4 (Auxin Response Factors 2, 3 y 4) son regulados a nivel post-transcripcional por la acción de pequeños RNAs de interferencia que actúan en trans (tasiRNAs), los cuales son producidos por medio de la vía del microRNA390 (miR390) y el transcripto trans-acting RNA3 (TAS3). Estudios previos demostraron que la sobreproducción de tasiRNAs derivados de TAS3 regula positivamente el crecimiento de las raíces laterales y negativamente la nodulación en Medicago truncatula (Hobecker et al., 2017. Plant Physiology 174: 2469?2486). Más recientemente, para evaluar si los tasiRNAs derivados de TAS3 actuaban a través de los factores ARF2, ARF3 y ARF4 hemos silenciado estos transcriptos mediante la expresión de una RNA de interferencia (RNAi ARF/2/3/4) que silencia simultáneamente a los tres mRNAs. La evaluación del fenotipo asociado a la nodulación y a la infección bacteriana en las raíces transgénicas reveló que el silenciamiento post-transcripcional de ARF2/3/4 disminuye significativamente la formación de los nódulos fijadores de nitrógeno y la infección bacteriana, sugiriendo que estos factores de transcripción cumplen una función crucial en el establecimiento de la asociación simbiótica. A fin de correlacionar su expresión con el desarrollo de las raíces laterales y nódulos, actualmente .estamos analizado el patrón espacio temporal de los genes ARF2 y ARF3 haciendo uso de fusiones de promotor a los genes reporteros GUS y GFP.