Separacion e identificacion de antifungicos procedentes de Dolichandra unguis-cati utiles en el control de hongos contaminantes de uvas y vino

APUD, G. R.; AREDES FERNANDEZ, P.A.; KRISTOF, I.; CATALÁN, C.A.N.; SAMPIETRO, D.A.

Cafayate

Congreso; I Jornada de Microbiologia sobre tematicas especificas del NOA; 2017

Asociación Argentina de Microbiología

Aspergillus niger y Aspergillus carbonarius provocanla podredumbre negra de la vid, reduciendo el rendimiento del viñedo,contaminando la uva y el vino elaborado a partir de ellas con ocratoxina A(OTA). Existe una creciente resistencia de Aspergillusa los fungicidas aplicados para su control. Los mismos en dosis subletalesinducen la acumulación fúngica de OTA. En ensayos previos nuestro grupo deinvestigación demostró que el extracto diclorometano del tallo de la liana Dolichandra unguis-cati presentó unasignificativa actividad antifúngica sobre A.niger y A. carbonarius. Elobjetivo de este trabajo fue separar e identificar las moléculas antifúngicas observadas.El extracto de tallo de la planta se obtuvo por maceración del material molidocon diclorometano (fCh2Cl2) durante 24 h y se evaporó asequedad en evaporador rotatorio al vacío. Los constituyentes del residuo secorecuperado se separaron mediante cromatografía en capa fina de sílica gel(CCF), se revelaron con luz UV, NP-PEG y p-anisaldehídoy se identificaron las bandas con actividad mediante bioautografía acoplada aCCF. Los constituyentes antifúngicos de fCh2Cl2 sesepararon mediante cromatografía en columna de silica gel (CC). Se ensayó laactividad antifúngica de las fracciones obtenidas mediante bioautografía ensiembra puntual y de capa fina. Los constituyentes de la fracción activa se identificaronmediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS). Estoscompuestos se separaron por CCF preparativa, se eluyeron con diclorometano y seensayó la actividad antifúngica de cada uno mediante bioautografía en siembrapuntual. Los resultadosobtenidos con las bioautografías acopladas a CCF del fCh2Cl2 indicaronactividad inhibitoria asociada a bandas observadas bajo UV254nm(Rf=0,70 y Rf=0,63), las cuales no revelaron con p-anisaldehído ni con NP-PEG. Las mismas se obtuvieron en lafracción 6 de la columna de silica gel. El GC-MS de esta última indicó lapresencia de triterpenos y la naftoquinona lapachol. Este último eluído decromatogramas de CCF preparativa y ensayado mediante microdilución indicóvalores de MIC = 250 ppm sobre ambas especies de Aspergillus. Los resultados obtenidos permiten concluir que ellapachol sería la sustancia de mayor actividad antifúngica sobre Aspergillus presente en el extractodiclorometano de tallo de D. unguis-cati.