Identificación de polifenoles con actividad trypanocida mediante el uso de herramientas computacionales

VALERA-VERA E; SAYE M; REIGADA C; MIRANDA MR; PEREIRA

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2018

La arginina quinasa (AK) es una proteina altamente conservada en in vertebrados que tambien se encuentra en tripanosomatidos. Cataliza la transferencia reversible de un brupo fosfato entre el ATP y la arginina para mantener el balance energetico celular, y en Trypanosoma cruzi gura como una enzima importante en la respuesta a estres. Al ser T. cruzi el agente etiologico de la enfermedad de Chagas, y la AK una enzima involucrada en la respuesta al estres experimenta durante el establecimiento de la infeccion que ademas no tiene homologos en humanos, se presenta como un blanco quimioterapeutico interesante. Distintos extractos de plantas han mostrado inhibir la actividad enzimatica de la AK en una gran variedad de organismos, incluidos los trypanosomatidos; y mas precisamente algunos polifenoles han sido exitosamente identicados como inhibidores de la enzima. En este trabajo usamos modelos computacionales que describen la interaccion molecular de distintos polifenoles con el sitio activo de la AK de T. cruzi (TcAK), partiendo de una base de datos de 326 polifenolesencontrados en plantas y usando el programa AutoDock 4.5 para el modelado. Aquellos compuestos que tuvieron un modelo de interaccion fuerte con el sitio activo de la TcAK se toman como los mas promisorios a inhibir la enzima, por lo que se procedio a buscar cuales estaban disponibles en el mercado para probar si eran capaces de inhibir la enzima y matar al parasito en distintos estadios del ciclo de vida. Finalmente se probo citotoxicidad en celulas Vero mediante tincion con cristal violeta para determinar ndices de selectividad.De los 5 polifenoles probados, la capsaicina y la delnidina mostraron la mayor actividad tripanocida en el estadio celular relevante para la infeccion en humanos, teniendo IC50 en escalas nanomolares y con altos indices de selectividad, pero solamente la delnidina mostro ser un fuerte inhibidor de la actividad AK, con un IC50 de 7 uM. Futuros estudios metabolicos del parasito en presencia de polifenoles asi como modelos computacionales serian realizados para determinar si en efeto la AK es el blanco molecular de los polifenoles en su actividad tripanocida; de cualquier manera, la alta activdad anti parasitaria y selectividad de los compuestos resultantes muestran el potencial de estos polifenoles como moleculas iniciales para el desarrollo de farmacos anti chagasicos.