RELEVANCIA DEL CLONADO E IDENTIFICACIÓN DE SITIOS DE INSERCIÓN DEL VIRUS DEL TUMOR MAMARIO MURINO (MMTV)

CIRIO, MC; GATTELLI, A; MARTINEZ, N; CASTILLA, LH; KORDON, EC

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2002

Hemos mostrado anteriormente que la progresión del fenotipo hormono-independiente (HI) en nuestro modelo se ve asociada a la aparición de nuevas inserciones de MMTV que no eran aparentes por análisis de Southern blot en los tumores hormono-dependientes (HD) originales. En el caso de un tumor HI que progresionó a este fenotipo espontáneamente, se clonó por la técnica de PCR inverso (I-PCR) una inserción viral en el gen de la integrina b1. Por PCR se confirmó que esta inserción estaba presente tanto en los tumores HI que presentaban la banda de Southern blot correspondiente, así como en poblaciones minoritarias de los pasajes HD en los que no se detectaban tales bandas. Esta inserción no aparecía, sin embargo, en tumores HI que provenían de un pasaje HD que permaneció dormido durante más 5 meses en una hembra virgen. Por otro lado, se clonó (por IPCR) una inserción en el gen Int2/ Fgf3 en un tumor HI que se originó de un pasaje que atravesó un largo período de latencia. En este caso hallamos que dicha inserción no estaba presente en el tumor HD original ni en otras variantes HI sino sólamente en aquellos tumores que se habían originados a partir de pasajes que atravesaron períodos de latencia similares. El clonado de loci en los cuales se ha insertado el MMTV además de permitirnos hallar nuevas mutaciones relevantes en la oncogénesis maMaría, es un excelente método para evaluar mecanismos de progresión tumoral a través del seguimiento de poblaciones celulares tumorales.