Uso de mutantes termosensibles para el estudio de la transcripción y replicación de rotavirus

MUÑOZ, MARIANNE; RÍOS, MARITZA; FERNANDEZ, JORGE; SPENCER, EUGENIO

Puyehue

Congreso; XXXVI Reunión anual de la Sociedad de Biología de Chile; 1993

La función de los distintos polipéptidos durante la morfogénesis de rotavirus, se estudia utilizando mutantes termosensibles de rotavirus SA11. El fenotipo de estas mutantes es ssRNA(-), dsRNA(-) o ambos. Esto no necesariamente significa que las funciones enzimáticas sean termosensibles, si no que el fenotipo puede deberse a que la mutación afecte dominios de las proteínas implicados en la morfogénesis de las distintas sub particulas asociadas a la transcripción y/o replicación. Con ente fin estudiamos la actividad de las mutantes in vitro, frente a distintas condiciones de temperatura y su sensibilidad a análogos de nucleótidos que inhiben la transcripción y replicación de rotavirus silvestre.La actividad transcripcional se ensayó utilizando el virus completo, mientras que para estudiar la replicación se desarrolló un ensayo que utiliza intermediarios morfogénicos. Los resultados indican que algunas mutantes presentan diferencias en la sensibilidad a análogos de nucleótidos y que son termosensibles in vitro, tanto en transcripción como en replicación. Además a temperatura restrictiva hay formación de pre cápsides vacías sugiriendo que son mutantes en actividades enzimáticas