Identificación de polifenoles con actividad tripanocida mediante el uso de herramientas computacionales.

VALERA-VERA, EDWARD; MIRANDA, MARIANA; SAYE, MELISA; PEREIRA, CA; REIGADA, CHANTAL

Resistencia

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

Sociedad Argentina de Protozoología (SAP)

La arginina quinasa (AK) es una proteína altamente conservada en invertebrados que también se encuentraen tripanosomatidos. Cataliza la transferencia reversible de un brupo fosfato entre el ATP y la arginina paramantener el balance energético celular, y en Trypanosoma cruzi figura como una enzima importante en larespuesta a estrés. Al ser T. cruzi el agente etiológico de la enfermedad de Chagas, y la AK una enzimainvolucrada en la respuesta al estres experimenta durante el establecimiento de la infección que ademas notiene homólogos en humanos, se presenta como un blanco quimioterapeutico interesante. Distintos extractosde plantas han mostrado inhibir la actividad enzimatica de la AK en una gran variedad de organismos,incluidos los trypanosomatidos; y mas precisamente algunos polifenoles han sido exitosamente identicadoscomo inhibidores de la enzima.En este trabajo usamos modelos computacionales que describen la interacción molecular de distintos polifenolescon el sitio activo de la AK de T. cruzi (TcAK), partiendo de una base de datos de 326 polifenolesencontrados en plantas y usando el programa AutoDock 4.5 para el modelado. Aquellos compuestos quetuvieron un modelo de interacción fuerte con el sitio activo de la TcAK se toman como los mas promisoriosa inhibir la enzima, por lo que se procedió a buscar cuáles estaban disponibles en el mercado para probar sieran capaces de inhibir la enzima y matar al parásito en distintos estadios del ciclo de vida. Finalmente seprobo citotoxicidad en células Vero mediante tincion con cristal violeta para determinar indices de selectividad.De los 5 polifenoles probados, la capsaicina y la delnidina mostraron la mayor actividad tripanocida enel estadio celular relevante para la infección en humanos, teniendo IC50 en escalas nanomolares y con altosíndices de selectividad, pero solamente la delnidina mostró ser un fuerte inhibidor de la actividad AK, conun IC50 de 7 uM. Futuros estudios metabólicos del parásito en presencia de polifenoles así como modeloscomputacionales serian realizados para determinar si en efecto la AK es el blanco molecular de los polifenolesen su actividad tripanocida; de cualquier manera, la alta actividad anti parasitaria y selectividad de loscompuestos resultantes muestran el potencial de estos polifenoles como moléculas iniciales para el desarrollode fármacos anti chagásicos.