El sistema endocannabinode es modulado por el estímulo lumínico en el segmento externo de los bastones de retina bovina

GAVEGLIO, V.L.; CHAMORRO AGUIRRE, E.; PASQUARÉ, S.J.

Córdoba

Congreso; XII CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA; 2018

El sistema endocannabinoide (SEC) está formado por los receptores cannabinoides (CB1, CB2, GPR55 y TRPV1), los ligandos que se unen a ellos, el 2-araquidonoil glicerol (2-AG) y la anandamida (AEA), y las enzimas responsables del metabolismo de estos lípidos. Estas moléculas están involucradas en mecanismos intracelulares de gran relevancia, teniendo funciones neuromoduladoras y neuroprotectoras. El SEC ha sido poco estudiado en la retina, si bien se ha demostrado su presencia, aún se desconoce su rol funcional en la visión. La entrada de luz al ojo es censada por moléculas receptoras ubicadas en los discos del segmento externo de las células fotorreceptoras. A este nivel, se inicia la conversión de la señal lumínica en señal eléctrica, proceso denominado fototransducción. El objetivo de la presente investigación fue determinar en el segmento externo de los bastones (ROS) la modulación del sistema endocannabinoide por el estímulo lumínico. Se evaluaron las actividades de las enzimas del metabolismo del 2-AG: la diacilglicerol lipasa (DAGL) y la lisofosfatidato fosfatasa (LPAPasa) (síntesis), y la monoacilglicerol lipasa (MAGL) (hidrólisis), en los ROS de retinas provenientes de ojos bovinos adaptados a la oscuridad (DROS) o expuestas a 3000 luxes por 30 minutos (LROS). DROS y LROS fueron purificados en un gradiente discontinuo de sacarosa y los ensayos enzimáticos se realizaron con sustratos radiomarcados. En LROS respecto a DROS la actividad de la DAGL se incrementó (103%), mientras que la actividad de la LPAPasa no mostró diferencias. El MAG, generado por la DAGL, se metabolizó a glicerol (37%) en ambas condiciones, lo que sugirió la acción de una MAGL. Esto se corroboró empleando MAG como sustrato exógeno, observándose un incremento (69%) en LROS. Los niveles de expresión proteica de las enzimas DAGLα y MAGL por Western blot fueron menores en LROS respecto a DROS. Por otra parte, en LROS aumentó la expresión de los receptores CB1 y CB2, disminuyó la del GPR55 y no se modificó la del TRPV1. Estos resultados evidencian que el SEC participaría activamente en el proceso de fototransducción.Financiamiento: ANPCyT, SCyT-UNS, CONICET, CIC.