Análogos estructurales del cristal violeta inhiben el transportador de prolina TcAAAP069 de Trypanosoma cruzi y presentan actividad tripanocida

SAYE M; VALERA-VERA E; GAUNA L; REIGADA C; MIRANDA MR; PEREIRA CA

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2018

La enfermedad de Chagas, cuyo agente etiologico es el parasito protozoario Trypanosoma cruzi, es una zoonosis que afecta alrededor de 7 millones de personas en America Latina. El cristal violeta (CV) se utilizo durante muchos a~nos como aditivo en bancos de sangre para prevenir la transmision de la enfermedad por transfusiones sanguneas. Uno de los mecanismos de accion reportado para el CV en T. cruzi involucra la inhibicion de la captacion de prolina. Ademas de ser un aminoacido relevante dado que constituye una fuentede carbono y energia alternativa a la glucosa, en T. cruzi, la prolina tambien es importante no solo para el crecimiento sino tambien para la diferenciacion entre estadios y la patogenesis. La permeasa de prolina TcAAAP069 pertenece a la familia de transportadores de aminoacidos y derivados TcAAAP, y constituye no solo un interesante blanco terapeutico sino tambien una posible va de ingreso de farmacos tripanocidas. En este trabajo se utilizo el CV como molecula de referencia en un virtual screening para identicar farmacos aprobados para uso clinico estructuralmente parecidos al CV con efecto biologico similar y menor toxicidad.Primero se valido el CV como inhibidor del transportador TcAAAP069 utilizando parasitos salvajes y parasitos que sobre-expresan la permeasa TcAAAP069 tanto en ensayos de transporte como de crecimiento.Luego se aplico una estrategia in silico de virtual screening usando como referencia el CV y se identicaron la olanzapina (OLZ, antipsicotico), la clofazimina (CFZ, antibiotico), la loratadina y la ciproheptadina (LTDy CPH, ambos antihistamnicos). Las cuatro drogas inhibieron el transporte de prolina y presentaron IC50s con valores entre 9 y 120 uM para los epimastigotes y entre 2 y 55 uM para los tripomastigotes de la cepa Y de T. cruzi. Ademas, CFZ, LTD y CPH tuvieron accion tripanocida en epimastigotes de las cepas CL Brener y en DM28c con IC50s en rangos similares a la cepa Y. Por ultimo, se observo un efecto sinergico entre el benznidazol y una mezcla de estos tres analogos del CV, evidenciado por los indices de combinacion y de reduccion de dosis. En conclusion, estos resultados sugieren que los analogos del CV LTD, CPH y CFZ son interesantes puntos de partida para el desarrollo de tratamientos alternativos contra la enfermedad de Chagas.