Activación de la vía de sobrevida PI3K/Akt y su modulación en células resistentes a vincristina (VCR) y a doxorubicina (DOX) derivadas de un linfoma T-murino.

GARCÍA MG; CORDO RUSSO R; ALANIZ L; ALVAREZ E; HAJOS SE

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LI Reunión Anual de la SAIC y LIV Reunión Anual de la SAI; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) y Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

La resistencia a multidrogas (MDR) se caracteriza por falta de respuesta al tratamiento quimioterápico, siendo alguna de las causas la sobre-expresión de bombas de eflujo de drogas como la Pgp y la inhibición de la apoptosis. La activación de PI3K por diferentes estímulos lleva a la fosforilación de Akt (pAkt) que a su vez fosforila diferentes proteínas involucradas en la sobrevida e inhibición de la apoptosis. El objetivo de este trabajo fue analizar la vía de señalización de PI3K/Akt en relación con MDR. Se utilizaron líneas celulares resistentes a VCR (LBR-V) y a DOX (LBR-D), ambas Pgp+ y sensible (LBR-) obtenidas previamente en nuestro laboratorio. Se evaluó pAkt por western blot encontrándose mayores niveles en las líneas resistentes que en la sensible. Utilizando inhibidores de esta vía, 0.5 μM wortmanina (W) y 10 μM LY294002 (LY), se analizó la apoptosis mediante microscopía de fluorescencia yAnnexinV observándose mayor apoptosis en LBR-D (17.6%+/-9.5% y 25.1%+/-7.4%) y LBR-V (17.4%+/-4.8% y 13%+/-5.7%) que en LBR- (3.8%+/-3.4% y 4%+/-1.8%) con W y LY respectivamente (P<0.01). Estos inhibidores disminuyeron la expresión de survivina, proteína que inhibe la apoptosis y de IkappaB, el inhibidor de NFkappaB, en las tres líneas celulares. VCR aumentó la expresión de pAkt y survivina; el co-tratamiento de LY y VCR incrementó laapoptosis en relación a VCR sola en LBR- (46.5%+/-11.7% vs 26.9%+/-4.9%)(P<0.05), y que LY solo en LBR-D (64.8%+/-6.8% vs 25.1%+/-7.4%)(P<0.001) y en LBR-V (40.3%+/-3.4% vs 13%+/-5.7%)(P<0.001), mientras que DOX no tuvo efecto sinérgico con LY en ninguna de las líneas. Además W y LY inhibieron el eflujo de drogas de la Pgp. Se concluye que la vía de PI3K/Akt se encuentra más activa en las líneas resistentes y que laactivación de Akt induce la expresión de survivina e inhibe NFkappaB. El quimioterápico VCR aumenta la actividad de esta vía y W y LY sinergizan el efecto apoptótico por inhibición de Akt y modulan el eflujo de drogas de la Pgp.