Toxicidad asociada a Ivermectina en la prueba de neutralización viral en el diagnóstico de arteritis viral equina

A. VISSANI; SERENA MS; ABEYA M; FERREIRA V; LOPEZ R; TRIGO P; ECHEVERRIA M. G; METZ GE

Rio Cuarto

Congreso; XXII Reunión Científico-Técnica de la Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico (AAVDL; 2018

IntroducciónLa Arteritis Viral Equina (AVE) es una enfermedad de los équidos de gran importancia económica en nuestro país. Es causada por el virus de Arteritis Equina (VAE), virus ARN SC (+) de la familia Arteriviridae, género Equarterivus.La mayoría de las infecciones ocurridas con el VAE suelen cursar de manera asintomática. Los padrillos infectados pueden transmitir el virus mediante vía respiratoria o venérea y pueden transformarse en portadores crónicos del virus en semen y diseminarlo mediante períodos variables sin intermitencia. En las yeguas infectadas los mayores problemas ocurren por abortos debido a infecciones en los comienzos de la gestación. Mientras que si la infección ocurre durante estadios avanzados, el virus puede pasar al feto y estos pueden nacer débiles o normales, o manifestar síndrome neumoentérico.El análisis de AVE se realiza mediante la técnica de Neutralización Viral (NV) empleando una muestra de sangre estéril a partir de la cual se determina el estado serológico de los animales. La presencia/ausencia de efecto citopático (ECP) en la muestra problema indica la ausencia/presencia de anticuerpos específicos para el VAE, siempre comparando con los controles de células (CC) y controles de virus (CV). Sin embargo en ocasiones existen problemas de toxicidad de la muestra solo evidenciables por comparación con el control de toxicidad (CT) en el cual solo se incuban las células y el suero problema.Nuestro objetivo de trabajo es analizar la relación entre la administración de Ivermectina y los efectos tóxicos observados en los ensayos de NV para el análisis de arteritis viral equina.Materiales y métodosEste trabajo fue realizado en el Servicio de Medicina y Cirugía de Grandes Animales del Hospital Escuela de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de La Plata. Se emplearon 5 animales del Hospital siendo 4 de ellos administrados con Ivermectina comercial 1,87% vía oral con una dosis de 0,2mg/kg. El animal 5 que no recibió el tratamiento, se utilizó como control negativo. Se tomaron muestras de sangre de cada animal previo a la administración de la Ivermectina (t=0), y a las 24hs (t=1), 48hs (t=2), 72hs (t=3), 96hs (t=4), y 1 semana (t=5) y 2 semanas (t=6) post administración de la misma. Brevemente, y siguiendo las especificaciones del Manual de la OIE, Capítulo2.5.10 referido al diagnóstico de Arteritis Viral Equina, cada una de las muestras se desueraron en condiciones de esterilidad y el suero obtenido fue descomplementado a 56°C por 30 minutos. Se sembraron 25 µl de cada uno de los sueros por duplicado y a dos diluciones diferentes (1/4 y 1/8). De igual modo, se realizaron los respectivos controles CC, CV y CT. El resultado del ensayo de neutralización se lee a las 72hs luego de sembrada las muestras. ResultadosLos resultados de la siguiente tabla, expresan el porcentaje de monocapa celular afectados por el efecto de la administración deIvermectina observados en el pocillo de control de toxicidad en cada una de las diluciones ensayadas. DiscusiónEl manual de la OIE expone la posibilidad de muestras tóxicas en las cuales es imposible establecer si las muestras son positivas o negativas a bajas diluciones. Trabajos previos han demostrado que el procesamiento de muestras de animales vacunados contra herpes equino genera cierto grado de toxicidad debido a que dicha vacuna es producida con las mismas células que son utilizadas en el ensayo de NV.Nuestro laboratorio suele recibir muestras tóxicas que en general dificultan pero permiten distinguir el status de la muestra remitida. Sin embargo, alguna de ellas poseen una elevada toxicidad por lo cual resulta imposible la entrega del resultado correspondiente.En general, los veterinarios y/o propietarios de animales a los cuales se les solicitaba nueva muestra, exponían la utilización reciente de diferentes fármacos a los animales siendo los más comunes antiparasitarios de uso rutinario en la industria equina.Según la farmacocinética y farmacodinamia de la Ivermectina, su concentración máxima en suero se encuentra a las 72 hs post administración y a partir de allí desciende su concentración de manera gradual hasta casi 1 mes de su administración. En este trabajo, encontramos que los mayores efectos tóxicos comienzan a observarse a las 72hs post administración de la droga y a partir de allí se mantiene o desciende la toxicidad en los cultivos en un grado variable.En este trabajo, encontramos una asociación directa entre la administración de Ivermectina y los resultados tóxicos observados en los ensayos de NV para el VAE. Los grados de variabilidad en la toxicidad observada pueden deberse a: diferencias en las dosis suministradas, vías de administración, metabolismo diferencial entre animales y tiempo post administración en el cual se extrae la muestra problema.ConclusiónEn conclusión, dependiendo de varios factores intrínsecos como las vías de administración, dosis y metabolismo animal, la Ivermectina es uno de los factores que genera toxicidad en los ensayos de neutralización viral para el virus de arteritis equina.