Proteómica en Trypanosoma cruzi: mapa funcional del trans-spliceosoma y su futura aplicación al diseño racional de drogas.

VAZQUEZ, MARTIN; ATORRASAGASTI, CATALINA; BERCOVICH, NATALIA; EDREIRA, MARTIN; LEVIN, MARIANO J

Chascomus, Buenos Aires, Argentina

Simposio; XX Reunión de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (Sociedad Argentina de Protozoología).; 2003

Trypanosoma cruzi depende exclusivamente de un mecanismo de trans-splicing para madurar a ARNm su transcripción policistrónica. Nuestro objetivo es construir el mapa funcional de interacciones proteicas del “trans-spliceosoma” para usarlo en el diseño racional de drogas que disocien interacciones proteína-proteína esencial para el parasito, sin afectar procesos semejantes del hospedador. Realizando “data mining” sobre la base de datos de secuenciado genómico de TIGR identificamos y clonamos 9 factores probablemente relacionados con el “trans-splicing”. Por técnicas de doble hibrido en levadura armaremos un mapa parcial de interacciones del trans-spliceosoma. Un ejemplo de este tipo de trabajo es la caracterización del heterodimero U2AF. Este factor está compuesto, en humanos, por las subunidades de 65kd y 35kd que se unen por un reconocimiento tipo “tongue in groove” mediado por triptófanos, muy conservados a los largo de la evolución. La U2AF35 de Tcruzi es la primera de este tipo de proteína que carece del triptófano necesario para la unión y como consecuencia no es capaz de interaccionar con U2AF65 humana. Esto indica que la interacción con la U2AF65 de Tcruzi se debe producir por otro mecanismo. De acuerdo con estos datos, no hemos podido localizar un homologo de la U2AF65 humana en Tcruzi, sin embargo hemos aislado una posible U2AF65 muy diferente de la humana. Esto nos permite postular que el heterodimero U2AF podría ser un excelente blanco para el diseño de drogas que impidan la formación de este herodimero de Tcruzi, sin afectar al humano. El rastreo de posibles drogas se realizará por la técnica de doble hibrido reverso.