Nanomedicinas antitoxoplasmicas para la via oral

M. JIMENA PRIETO, PRISCILA SCHILRREFF, M.J. MORILLA, Y EDER L. ROMERO

La Rural

Jornada; JorFyBI; 2007

SAFYBI

Introducción: Pacientes inmunodeprimidos (cáncer, SIDA, transplantes) que sufren toxoplasmosis por reactivación, una manifestación mortal de la enfermedad, son tratados con sulfadiazina (SDZ), un antifolato que actúa en forma sinérgica con pyrimetamina (PYR). En tratamientos contra protozoarios de ciclos de vida complejos como el T gondii, las drogas deberían acceder físicamente sobre cada estadio parasitario. Sin embargo, las drogas convencionales, no tienen efecto sobre las formas intracelulares (bradizoitos) agrupados en quistes fundamentalmente en cerebro y músculo, probablemente porque sea necesario atravesar la membrana plasmática de la célula hospedadora y luego la pared del quiste. Para compensar esta dificultad, se administran dosis de SDZ y de PYR tan elevadas que causan toxicidad en el hospedador. En este contexto, proponemos el empleo de una nanomedicina o nanosistema de entrega (nanoSED) de SDZ, que permita reducir la toxicidad de SDZ e incrementar su acceso a los quistes intracelulares. Los dendrímeros (D) son nanoSED con potencialidad para controlar tanto farmacocinética como biodistribución de moléculas incorporadas a su interior. Este trabajo presenta los estudios in vitro de captación, tránsito y ubicación intracelular en dos líneas celulares, de SDZ complejada con dendrímeros PAMAM G4 y G4,5, así como su farmacocinética y biodistribución luego de ser administrados a ratas por vía parenteral y por vía oral. Materiales y Métodos: Se emplearon dendrímeros PAMAM-G4 y PAMAM-G4,5 complejados con SDZ, en relación 1:35 (D:SDZ, mol: mol). Ensayos in vitro: Se empleó microscopía confocal y citometría de flujo, para determinar tanto la cinética de captación como el tránsito intracelular, de dendrímeros marcados con FITC, por células Vero y la línea derivada de macrófagos murinos J774. Ensayos in vivo: Con el fin de estudiar la biodistribución y farmacocinética de la SDZ dendrimérica, los complejos fueron administrados a dosis de 1,2mg SDZ/kg por vía intravenosa y de 7,2mg SDZ/kg por vía oral a ratas Wistar. Se tomaron muestras de sangre a distintos tiempos y finalizado el ensayo, se sacrificaron los animales. La SDZ se extrajo de las matrices biológicas y se cuantificó por HPLC. Resultados: Ensayos in vitro: Nuestros resultados permitieron observar el ingreso masivo de los dendrímeros-FITC y dendrímeros-FITC-SDZ tanto a células: Vero (endocítica) y J774 (macrofágica). Ensayos in vivo: La SDZ dendrimérica, administrada por vía oral, alcanzó en sangre una concentración 2 veces mayor con respecto a la SDZ libre a las tres horas post-administración. A su vez, la concentración obtenida por administración parenteral fue de 9 veces mayor respecto a la SDZ libre (3h post-administración). Los ensayos de biodistribución demostraron el acceso de la SDZ dendrimérica, a diferencia de la droga libre, a órganos blancos como el cerebro donde la reactivación de la infección latente por la liberación de bradizoitos, puede producir focos de destrucción celular, que podrían ser fatales (encefalitis toxoplásmica). Conclusiones: Los dendrímeros PAMAM G4 y G4,5 pueden ser capturados sin toxicidad por potenciales células hospedadoras, además modificar la farmacocinética y biodistribución de la droga, mejorando así la biodisponibilidad de la misma para poder ingresar a las células infectadas y así ejercer su acción terapéutica. Esto permitiría tener un mayor efecto con dosis menores a las utilizadas en el tratamiento convencional, además de facilitar la llegada de la droga a distintos órganos que en su forma libre no podría acceder. Por lo tanto, los resultados permiten proponer a los complejos PAMAM-SDZ como candidatos ideales para ingresar masiva y selectivamente SDZ a quistes intracelulares.