Caracterización molecular de los mecanismos de sensibilidad disminuida a ciprofloxacina (SDC) en los primeros aislamientos de Neisseria meningitidis (Nme) de Argentina

CORSO A; FACCONE D; MIRANDA M; JORDÁ L; REGUEIRA M; CARRANZA C; VECINA C; GALAS M

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Latinoamericano y X Congreso Argentino de Microbiología; 2004

Hasta la fecha sólo se han detectado 3 aislamientos de Nme con SDC en el mundo: el 1ro. en Francia (1999), el 2do. En Australia (2000) y el último en España (2003). Los mecanismos de resistencia involucrados en esas cepas fueron mutaciones en la región determinante de resistencia a quinolonas (QRDR) de la subunidad gyrA de la ADN girasa (Asp-Gly o Asn o Thr91-Ile). Desde el año 1991, en el INEI se realiza  la vigilancia de serogrupos y resistencia a los antimicrobianos de aislamientos invasivos de Nme del país. En el año 2002 detectamos el 1er Nme con SDC (M5191), el cual fue aislado de LCR de una mujer de 63 años del HAC. En el 2003, se detecta el 2do Nme con SDC (M5507) de muestras de LCR y sangre de una niña de de 1 año del PLA. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar el/los mecanismos responsables de las SDC en los primeros aislamientos de Nme en Argentina. El serogrupo fue determiando por la técnica de aglutinación en lámina. Las CIMs  se determinaron por le método de dilución en agar según NCCLS. La amplificación y secuenciación de los QRDR de los genes gyrA y ParC se realizó según la metodología estándar. Las CIMs a ácido ácido nalidixico (NAL) y ciprofloxacina (CIP) se ensayaron con y sin el agregado de 6.25 mg/L de reserpina (inhibidor de varios tipos de bombas de eflujo). Los Nme sensibles a CIP EMGM-2, -10, -13 (Inst. Carlos III, España), fueron utilizados como control. Nme M5191 y M5507 se caracterizaron como como Y y B respectivamente. Las CIMs (en ug/ml) fueron: penicilina 0.03/0.12; ampicilina 0.06/0.25; ceftriaxona 0.001/0.002, rifampicina 0.008/0.008; cloranfenicol 0.5/0.5 y tetraciclina 0.12/0.12, ambas cepas mostraron resistencia a NAL 64/64 y SDC 0.12/0.06. Las secuencias QRDR de gyrA y parC en Nme M5191, no presentaron mutaciones cuando se las comparó a los QRDR de cepas sensibles. En Nme M5507 detectamos una mutación en el QRDR de gyrA de Asp-95-Asn, y ninguna mutación en el parC. Nme M5191, las CIMs de CIP y NAL se redujeron con el agregado de reserpina a 0.004 y 0.5 ug/ml, respectivamente. Por el contrario, las CIMs a CIP y NAL no se vieron afectadas por el agregado de reserpina en Nme M5507 y EMGM-2, -10, y -13. El mecanismo responsable de la SDC en Nme M5507 es la presencia de la mutación Asp-95-Asn en el QRDR de gyrA, la cual es idéntica a la descripta en Australia. La Ausencia de mutaciones en los QRDR de los genes gyrA y parC de Nme M5191 y la reducción de las CIM a CIP y NAL po el agregado de reserpina sugieren un posible mecanismo de eflujo en esta cepa. Los Nme presentados en este estudio representan los primeros con SDC descritos en Argentina, y los 4to. y 5to. en el mundo.