OMVs de Campylobacter fetus: ¿Pueden constituir un candidato vacunal?

PABLO FARACE; CLAUDIA MORSELLA; FERNANDO PAOLICCHI; SILVIO CRAVERO; ANDREA GIOFFRÉ

La Plata, Buenos Aires, Argentina

Taller; Taller sobre vacunas: Vacunología 2018, Tercera Edición; 2018

Campylobacterfetuses un patógeno asociado a infertilidad y abortos en vacunos yovinos. Las vesículas de membrana externa (OMVs) contienencomponentes de la membrana externa y del periplasma y constituyen una interfase hospedador-patógeno multifunción. Las OMVs de lasbacterias patogénicas tienen un rol en la modulación del sistemainmune, lo que las convierte en potenciales candidatos vacunales.Elobjetivo del presente trabajo es determinar la presencia decomponentes inmunoreactivos en las OMVs de C.fetus.Secreció una cepa de C.fetusen caldo Brucella (BD) en condiciones de microaerofilia. Las OMVs sepurificaron a partir del sobrenadante de cultivo por filtración yultracentrifugación y se confirmó su presencia mediante microscopíaelectrónica de transmisión (MET) (acetato de uranilo 1%).Posteriormente, se realizó un dot-immunoblotpara determinar la presencia de componentes inmunoreactivos medianteel empleo de un suero policlonal dirigido a proteínas totales de C.fetus producidoen conejo. Para revelar la interacción se empleó un anticuerpoanti IgG-conejo conjugado a fosfatasa alcalina (Sigma-Aldrich). Comocontroles negativos se emplearon el sobrenadante de cultivo, caldoBrucella y PBS 1X, y como control positivo, proteínas de labacteria. PorMET se comprobó la presencia de OMVs de C.fetusen la fracción estudiada y la ausencia de bacterias. La intensidadde señal obtenida en el ensayo dot-immunoblotpermitió determinar la presencia de componentes inmunoreactivos enlas OMVs de C.fetus.Las imágenes de MET nos permiten visualizar la presencia de una?S-layer? en la superficie de las OMVs, siendo las proteínas queconstituyen esta cubierta en la bacteria (SLPs), inmunoreactivas.Esto nos permite inferir que la inmunoreactividad observada podríadeberse, parcialmente, a esta proteína. Eneste estudio preliminar, hemos demostrado la presencia de compuestosinmunoreactivos en las OMVs y nos invita a profundizar sucaracterización para proponerlas definitivamente como candidatosvacunales.p { margin-bottom: 0.1in; line-height: 115%; background: transparent none repeat scroll 0% 0%; }