ROR2 retrasa la progresión del ciclo celular e inhibe la proliferación de células de melanoma

CASTRO MV; BARBERO G; VILLANUEVA MB; LOPEZ BERGAMI P

Buenos Aires

Jornada; Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2018

Instituto Angel Roffo

Losreceptores de tirosina quinasa ROR1 y ROR2 han sido caracterizados como losreceptores celulares del ligando Wnt5a. Estos receptores juegan un papel claveen el desarrollo embrionario pero su expresión se vuelve indetectable en laadultez. Sin embargo, estas proteínas vuelven a expresarse en distintaspatologías incluyendo cáncer. Wnt5a y ROR1 están siendo evaluados como nuevosblancos terapéuticos en cáncer, mientras que ROR2 presenta un rol contradictorioen cáncer, pudiendo actuar como pro-tumorigénico o anti-tumorigénicodependiendo del tipo tumoral. Por ello, el objetivo de este trabajo esdeterminar el rol de ROR2 en melanoma con especial énfasis en su efecto sobrela proliferación y el ciclo celular. Para ello utilizamos  estrategias de ganancia (expresión de ADNcopia) y perdida de función (ARN interferencia) de ROR2 en las líneas celularesA375 y M2 respectivamente.  Nuestrosresultados mostraron que ROR2 disminuye significativamente la proliferación y elporcentaje de células en G2/M. A nivel molecular, ROR2 regula negativamente laactivación de Akt, STAT3 y p65, y la expresión de Ciclina D1 y Cdk4. Asimismo,ROR2 disminuye los niveles de fosforilación de Retinoblastoma (Rb), lo cualcorrelacionó con un aumento de Rb nuclear. Sumado a ello, la sobreexpresión deROR2 provocó un aumento en los niveles proteicos y localización nuclear de p21.Paraevaluar como ROR2 regula la progresión del ciclo celular, realizamos ensayoscon células sincronizadas en G1. Luego de ser liberadas del arresto, lapresencia de ROR2 genera un transito mas lento hacia la fase G2/M. Estosresultados se correlacionan con cambios en marcadores típicos del ciclocelular. En células control la expresión de Ciclina A tiene un máximo a las 12hs luego de reiniciado el ciclo y luego decae. Al sobreexpresar ROR2 el pico deCiclina A recién se alcanza a las 24 hs. Por su parte, en las células M2control, Ciclina A alcanza su máximo a las 28 hs y se adelanta a las 16 hs alsilenciar ROR2. Datos similares fueron observados para Ciclina B1. Estosresultados sugieren un rol anti-tumorigénico de ROR2 en melanoma, disminuyendola proliferación y dilatando la progresión del ciclo celular, mediante laregulación de la abundancia de proteínas vinculadas a estas funcionescelulares. En este sentido, el balance entre la expresión de ROR1 y ROR2 cumpliríaun importante rol balanceando los efectos de la vía Wnt sobre la progresión delmelanoma.