El envejecimiento celular prematuro involucra cambios en la expresión de RAC3 que participa en el desarrollo tumoral

RUIZ GRECCO MARINA; RUBIO M FERNANDA; LARROSA P. NICOLÁS; ALVARADO CECILIA; MICENMACHER SABRINA; COSTAS MÓNICA

Buenos Aires

Jornada; VIII JORNADAS CIENTIFICAS DEL INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MEDICAS ALFREDO LANARI; 2009

Instituto de Investigaciones Medicas Dr Alfredo Lanari

La senescencia celular es un proceso genéticamente controlado que involucra el arresto irreversible del ciclo celular y puede ocurrir por dos mecanismos: acortamiento de telómeros o acumulación de daños genómicos a lo largo del tiempo. Si bien es un mecanismo que previene el desarrollo tumoral al inhibirse la propagación de células con daños genómicos, las células senescentes cambian su patrón de expresión de proteínas que pueden favorecer el desarrollo tumoral de otras células no senescentes. Ese cambio involucra rearreglos en la estructura del DNA por heterocromatinización. Dado que RAC3 es un coactivador de receptores nucleares y de NF-kB, que interviene en el remodelado de la cromatina y según demostramos previamente contribuye al desarrollo tumoral, en este trabajo se quiso determinar la posible participación de RAC3 en el envejecimiento prematuro de las células. Para ésto se trabajó sobre un modelo de células fibroblásticas normales humanas WI38 y dos estímulos inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o Rapamicina (RAPA-citostático inhibidor de vía mTOR). Se determinó  arresto del ciclo celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento. Se observó por microscopia de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño nuclear: 10% de núcleos gigantes con apariencia de grandes focos heterocromáticos y células binucleadas a 6 días postratamiento con RAPA. Se determinó por WB que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con RAPA. Observamos por WB que RAC3 sufre una disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las 24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con RAPA. Estos hallazgos sugieren la importancia de la regulación en los niveles de expresión de RAC3. Mientras una alta expresión está involucrada en el desarrollo tumoral, bajos niveles acompàñan al estado senescente, probablemente preservado la expansión de células con acúmulo de errores genómicos.