INQUISAL   20936
INSTITUTO DE QUIMICA DE SAN LUIS "DR. ROBERTO ANTONIO OLSINA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Magneto-immunosensor microfluidico para la cuantificación de anticuerpos IgG anti-Helicobacter pylori en muestras de suero humano
Autor/es:
SIRLEY V. PEREIRA; MARCO A. SEIA; JULIO RABA; GERMÁN A. MESSINA
Lugar:
Bahía Blanca, Argentina.
Reunión:
Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica.; 2009
Resumen:
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En este trabajo se describe el desarrollo de un magneto-inmunosensor microfluídico
[1-4] acoplado a un electrodo de oro para la cuantificación rápida y sensible
de anticuerpos IgG anti-helicobacter pylori en muestras de suero humano. Este
microorganismo es uno de los agentes causales de úlcera péptica y gastritis crónica,
estas patologías son consideradas factores de riesgo para el desarrollo de
cáncer gástrico, el cual ocupa el segundo lugar entre
las causas de muerte por cáncer en todo el mundo [6].
El sensor se automatizó completamente y la detección de anticuerpos en
muestras de suero fue llevada a cabo empleando un inmunoensayo no competitivo
[7] en el cual los antígenos purificados de H. pylori fueron
inmovilizados sobre partículas magnéticas 3-aminopropilo-modificadas. Dichas
partículas se inyectaron dentro del microcanal central del dispositivo y se
manipularon por la acción del campo magnético generado por un imán externo
removible [8]. Posteriormente los anticuerpos presentes en muestras de suero
humano reaccionaron inmunológicamente con los antígenos inmovilizados, estos anticuerpos
fueron cuantificados utilizando un segundo anticuerpo marcado con la enzima
fosfatasa alcalina (AP). p-aminofenolfosfato (p-APP) fue transformado en
p-aminofenol (p-AP) por la acción de AP y fue detectado sobre una película de
oro (electrodo de trabajo) a 0.250V (Volt).
La corriente obtenida como respuesta de la oxidación del producto de la
reacción enzimática fue directamente proporcional a la actividad enzimática y
consecuentemente a la concentración de anticuerpos de tipo IgG en muestras de suero.
La detección electroquímica se realizó dentro de 1 minuto y el tiempo total del
ensayo fue de 25 minutos [9]. Los límites de detección calculados para la
detección electroquímica y el procedimiento de ELISA fueron de 0.37 y 2.1 UmL-1,
respectivamente, y los coeficientes de variación intra e inter ensayo fueron
menores al 5%. Los resultados obtenidos revelan la potencial utilidad de
nuestro microbiochip para la rápida determinación de anticuerpos de tipo IgG
anti H. pylori.