Análisis de activación de líneas celulares epiteliales procedentes de distintas mucosas por agonistas de la respuesta innata.

GONZÁLEZ MACIEL, DOLORES; ROMANIN, DAVID (1);; HIRIART YANINA,; DOMINIK MEIER; MARTIN RUMBO

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LXI Reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> El epitelio de las mucosas actúa como un integrador de distintas señales provenientes del lumen y el medio interno. Es capaz de activar una respuesta innata inducible frente a la presencia de señales de invasión de la mucosa, promoviendo la defensa del organismo. El presente trabajo tiene por objetivo caracterizar la respuesta de líneas celulares epiteliales usualmente utilizadas como modelo frente a distintos agonistas de la respuesta innata y citoquinas proinflamatorias. Se emplearon las líneas epiteliales Caco-2, T84 y HT29 (intestinal humana); mICcl2 (intestinal murina), AGS (gástrica humana) y A549 (alveolar humana). Se incubaron con los agonistas de: TLR5 (flagelina de S. thiphimurium, 1ug/mL); TLR 4 (LPS de E. coli, 100 ng/mL); TLR2 (PAM3Cys, 1ug/mL); TLR3 (poli I:C, 10 ug/mL); IL1b (10 ng/mL) y TNFa (100 ng/mL). En todos los casos se analizó por RT-qPCR a las 2 hs de inducción la expresión de CCL20 y en muestras seleccionadas se analizó además la expresión de CXCL2, CXCL8 y CXCL10. En todas las líneas se indujo la expresión de CCL20 (p<0.01) en alguna condición confirmando la distribución amplia de esta respuesta en epitelios. Entre los agonistas, flagelina fue capaz de activar el mayor número de líneas celulares (todas excepto mICcl2), mientras que todas las lineas resultaron respondedoras frente a las citoquinas empleadas. Los mayores niveles de inducción los mostraron las líneas Caco-2 (incremento relativo IR de 300 +/- 50 veces respecto al no estimulado) y AGS (IR de 2200 +/- 200). La reactividad frente a LPS estuvo restringida a la línea HT29. En todos los casos se observó una correlación entre la inducción transcripcional de CXCL2, CXCL8 , CXCL10 y CCL20. No se encontró un perfil unificado de reactividad, sino que cada línea celular presenta características propias, aún entre líneas celulares de procedencia similar. Este trabajo permite seleccionar la línea celular adecuada de acuerdo a la vía en estudio.