INVESTIGADORES
RUMBO Martin
congresos y reuniones científicas
Título:
Inhibición de la expresión de CCL20 en células de epitelio intestinal por levaduras aisladas de kefir: estudios in vitro e in vivo
Autor/es:
ROMANIN, DAVID (1);; SERRADELL, MARIA (1,3);; GONZÁLEZ MACIEL, DOLORES; PABLO STRINGA; NATALIA LAUSADA; GARROTE, GRACIELA (1,3); MARTIN RUMBO
Lugar:
La Falda, Cordoba, Argentina
Reunión:
Congreso; LX reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología. La Falda, noviembre de 2008; 2008
Resumen:
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Se han descripto diversos
mecanismos de modulación de la respuesta innata en mucosas mediada por numerosas
especies bacterianas diferentes, sin embargo, el conocimiento sobre la
capacidad inmunomodulatoria de las levaduras es más limitado. En trabajos
previos hemos demostrado que distintas especies de levaduras aisladas de kefir inhiben
el efecto de la estimulación de células Caco-2 con flagelina (FliC), tanto en
un sistema reportero (Caco-2 ccl20:luciferasa), como sobre la expresión del
mRNA de CCL20, CXCL-8 y CXCL-2.
En el presente trabajo se seleccionó
la cepa Kluyveromyces marxianus CIDCA
8154 (Km 8154) y se estudió su capacidad de inhibir la expresión de CCL20
inducida por FliC en células epiteliales en cultivo (líneas intestinales
humanas Caco-2 y HT-29, y cultivo primario de enterocitos murinos), y en un
modelo de asa ligada en ratón.
La pre-incubación de células
Caco-2 con una suspensión de Km 8154 (108 ufc/ml) redujo en 30 veces
la expresión del mRNA de CCL20 inducida por FliC (P<0.05). Resultados
similares fueron obtenidos sobre células HT-29, tanto estimulando con FliC como
con LPS.
Por otro lado, el aumento en la
expresión del mRNA de CCL20 en un cultivo primario de enterocitos murinos estimulados
con FliC se redujo a niveles basales (P<0.05) debido a la pre-incubación con
Km 8154. En base a estos resultados, se realizó un ensayo in vivo empleando un modelo de asa intestinal ligada en ratones
BALB/c. Los animales fueron anestesiados y permanecieron en dicho estado
durante todo el experimento. Luego de la ligación, se inyectó intraluminalmente
una suspensión de Km 8154 (2.3 ±0.5 107 levaduras) o PBS en la
región proximal, y luego de 30 minutos, se inoculó una solución de FliC (450 mg/ratón)
o PBS. Los animales fueron sacrificados 90 minutos luego de la última
inoculación. En estas condiciones, los ratones tratados con FliC mostraron un
incremento de 3±0.1 veces en la expresión del mRNA de CCL20 y la administración
previa de Km 8154 en el lumen intestinal redujo los efectos de la estimulación
con FliC a niveles basales (P<0.05).
Los resultados obtenidos
muestran que el efecto observado no se restringe a una línea celular
particular, sino que la interacción levadura-epitelio es capaz de modular la
activación de la respuesta innata epitelial tanto en modelos ex vivo como in vivo. Esta propiedad podría ser de utilidad en el tratamiento de
patologías asociadas a fenómenos inflamatorios del tracto gastrointestinal.