Utilización de Vesículas de Membrana Externa (OMVs) de Bordetella pertussis como vacuna intranasal anti-pertussis.

GRISELDA MORENO; ROBERTS, ROY; ERREA AGUSTINA; CELINA CASTUMA; MARTIN RUMBO; DANIELA HOZBOR

La Falda

Congreso; LX reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2008

&amp;amp;amp;amp;lt;!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-TRAD; mso-fareast-language:FR;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --&amp;amp;amp;amp;gt; <!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-TRAD;} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Si bien <!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-TRAD;} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 63.0pt; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Si bien existen vacunas celulares y acelulares de aplicación masiva a nivel poblacional contra pertussis o tos convulsa, existe una remergencia de esta enfermedad aún en lugares con alta cobertura de vacunación. Las vacunas acelulares presentan menos reactogenicidad que la vacuna formulada con la bacteria entera. Las vesículas de membrana externa (OMVs) de B.pertussis pueden constituir un antígeno vacunal ya que muchos de los inmunógenos presentes en las vacunas acelulares son proteínas de membrana y estarían presentes en las OMVs en una conformación nativa. Objetivos: Caracterizar las OMVs, evaluar la respuesta innata desencadenada en pulmón por administración intranasal (i.n.) de OMVs y su capacidad protectora cuando estás son administradas por vía i.n. en el modelo murino de desafío i.n. con B. pertussis. Resultados: En las OMVs se identificaron 43 componentes proteicos diferentes mediante 2D-PAGE-MALDI y westernblot, entre ellos pertactina, toxina pertussis y adenilato ciclasa, inmunógenos empleados en vacunas acelulares. La administración de OMVs i.n. generó un incremento significativo (p<0.001) en los niveles de expresión de TNFa, IL6 y CCL20 a las 2 y 8 hs, Niveles de expresión a las 2 horas Promedio±SEM CCL20   IL 6   TNFa   Naive 1.24±0.33 0.99±0.21 1.04±0.318 PBS 0.43±0.16 1.61±0.84 1.32±0.26 Bp 4.14±1.43 6.43±0.70 13.22±1.98 dOMVs 14.41±4.98 11.9±2.3 20.3±3.29 Las inmunización i.n. con OMV (5 ug/50 uL, en 2 dosis: día 1 y día 15, desafío:107 UFC al día 25) produjo una significativa disminución en el número de UFC en pulmón 5 y 8 días post-desafío (5 días: 2.10±0.81 vs 3.30±0.9 log10UFC para OMVs vs bacteria entera, y el grupo control: 5.94±0.40, p<0.05; 8días: sin recuento para OMVs, 1.14±1.59 log10UFC para Bacteria entera, y grupo control: 2.54±2.44 log10UFC). Los niveles de protección fueron similares a los logrados con una formulación de bacteria entera (2×108UFC/ml, dosis:50μl). La toxicidad del tratamiento resulto aceptable según criterios de la OMS (evolución del peso a las 16hs, 3 y 7 días post- inmunización). Sin embargo los animales que recibieron OMVs mostraron un mayor impacto en su evolución de peso que los otros tratamientos analizados. Conclusiones: Las OMVs presentan antígenos vacunales asociados a membranas bacterianas y son candidatos factibles de ser utilizados como vacuna acelular contra pertussis, a través de la administración intranasal. Se deben optimizar estrategias para asegurar la inmunogenicidad de este candidato minimizando los efectos tóxicos.