empty spiracles como gen de efecto materno en Rhodnius prolixus

NAZAR, AN; LAVORE, AE

Chascomús

Taller; IV° Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2018

Desde que empty spiracles (ems) fue identificado y caracterizado como gen gap en Drosophila melanogaster, numerosos estudios se han llevado a cabo con la finalidad de corroborar su homología de función en la correcta formación de la cabeza y el sistema traqueal de insectos. Nuestro grupo de trabajo identificó una región codificante para ems en el genoma de Rhodnius prolixus, hemíptero vector de la enfermedad del Chagas, compuesta por tres dominios: dos de ellos altamente conservados en la clase insecta, tanto a nivel de secuencia como a nivel funcional (dominio N-terminal y el homeodominio); y un tercero (dominio C-terminal), el cual no se encuentra presente en dípteros. En este trabajo se llevó a cabo el análisis funcional del dominio C-terminal de Rp-ems (Rp-emsDC). A través del silenciamiento específico por la técnica ARNi parental, se analizaron un total de 373 huevos ovipuestos por hembras interferidas. Mediante observación directa en lupa y microscopía confocal se determinó que 331 huevos no desarrollaron embrión. Usando la técnica de hibridación in situ en ovariolas de hembras wt y huevos colectados de sus oviductos (huevos a tiempo cero de desarrollo), se pudo validar la expresión materna de Rp-emsDC. Estos resultados, hallados hasta el momento para ems sólo en Apis mellifera, nos permitió caracterizar a Rp-emsDC como una variante de splicing alternativo de efecto materno y que es determinante en la correcta formación del cigoto.