INVESTIGADORES
REY Florencia
congresos y reuniones científicas
Título:
Purificación de transglutaminasa de tejido a partir de hígado de cerdo
Autor/es:
REY F, ALEANI M
Lugar:
UNL, Santa Fe
Reunión:
Jornada; II Encuentro Bioquímico del Litoral y V Jornada de comunicación técnico científica; 2000
Institución organizadora:
Universidad Nacional del Litoral
Resumen:
La transglutaminasa de tejido pertenece a una familia de enzimas que se encuentra en distintos tejidos de animales. Cataliza dos tipos de reacciones sobre sustratos que posean grupos amida (residuos glutamínicos): deamidación y reticulación. La única enzima comercial disponble proviene de hígado de cobayo. En este trabajo se extrajo y purificó parcialmente la enzima a partir de hígado de cerdo, utilizando distintas técnicas cromatográficas: cromatografía de metal quelado, afinidad por anticuerpo y afinidad por sustrato (caseína). Los resultados se analizaron por determinación de concentración de proteínas totales, por electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE-SDS), por inmunoblotting y por deteminación de actividad enzimática. Con la matriz de metal quelado se purificó parcialmente la enzima, pero se obtuvo inactiva. El mejor resultado se obtuvo con la matriz de afinidad por sustrato . La actividad específica del extracto original y la fracción purificada por esta columna fueron respectivamente de 4 10-4 UI/mg y de 0,23 UI/ mg lo que corresponde a una purificación aumentada de 575 veces