Expresion de la isoforma Tipo 1 de la enzima 11 beta;- hidroxiesteroide deshidrogenada en foliculos ovaricos bovinos

AMWEG A; PAREDES A; SALVETTI NR; ALFARO N; LARA HE; ORTEGA HH

Cordoba

Congreso; 10 Congreso Argentino de Ciencias Morfologicas.; 2008

Los glucocorticoides act¨²an directamente sobre las c¨¦lulas ov¨¢ricas inhibiendo la acci¨®n de las gonadotrofinas y la s¨ªntesis de esteroides. Estas funciones son reguladas por isoformas de la enzima 11¦Â-hidroxiesteroide dehidrogenasa (11¦ÂHSD). El objetivo del presente trabajo fue identificar la expresi¨®n de 11¦ÂHSD1 en fol¨ªculos ov¨¢ricos bovinos, la cual act¨²a predominantemente como una reductasa NADP(H) dependiente para generar cortisol activo. Se utilizaron muestras de ovarios obtenidas en frigor¨ªfico, las que fueron fijadas en formol bufferado al 10% durante 8 hs, lav¨¢ndose luego en buffer fosfato salino y proces¨¢ndose siguiendo protocolos de rutina para efectuar la inclusi¨®n en parafina. Luego, se efectuaron cortes seriados, de 4 mm de espesor sobre los que se realiz¨® una t¨¦cnica inmunohistoqu¨ªmica indirecta para la determinaci¨®n de 11¦ÂHSD-1. La reacci¨®n fue revelada utilizando 3,3´ diaminobencidina como crom¨®geno. La especificidad del anticuerpo, se analiz¨® por Western Blot en muestras de ovario y gl¨¢ndula adrenal. Se evalu¨® la inmunoreacci¨®n en las tres capas foliculares (granulosa, teca interna y teca externa) de fol¨ªculos secundarios, terciarios y atr¨¦sicos. Se localiz¨® 11¦ÂHSD-1 en la pared de los fol¨ªculos terciarios y en menor intensidad en secundarios, siendo mayor la expresi¨®n en la granulosa y  menor en teca interna, estando ausente en la externa. Por Western Blot se detect¨® una banda a aproximadamente 32 KDa que se correspondi¨® con el peso molecular de 11¦ÂHSD-1. Basados en estos resultados podr¨ªamos inferir que la activaci¨®n local del cortisol por la 11¦ÂHSD-1 en los fol¨ªculos ov¨¢ricos bovinos podr¨ªa cumplir funciones importantes en la regulaci¨®n de la funci¨®n ov¨¢rica. Considerando que la ovulaci¨®n se trata de un proceso inflamatorio mediado por interleuquinas y prostaglandinas, su participaci¨®n podr¨ªa ser crucial en la patogenia de enfermedades que cursan con anovulaci¨®n.