Polimorfismo de IRF6 y la Fisura Labio- Palatina: Búsqueda de una técnica de detección simple y rápida (Poymorphism in IRF6 and orofacial clefting: searching for a fast detection technique)

CHIRIOTTO TS; EE CÓRDOBA; AF DE GANZÓ; R D´ERRICO; GW ABRILE; C CHEROKI

Viña del Mar

Congreso; XIV Congreso Latinoamericano de Genética ALAG 2010; 2010

Asociación Latinoamericana de Genética

La fisura de labio con o sin fisura de paladar no sindrómica (FL/P NS) es una malformación congénita que afecta estructuras orofaciales. En el presente trabajo se optimizó una técnica de detección rápida de la mutación G820A, sustitución no sinónima (Val274Ile) en el gen IRF6, correlacionada con el aumento del riesgo de desarrollar FL/P NS. Previo consentimiento informado, se analizaron muestras de familias afectadas integrantes del Centro Interdisciplinario del Fisurado Labio Alvéolo Palatino. Se extrajo ADN de sangre periférica (CTAB) o hisopado bucal (TEC-SDS) se construyeron cebadores (http://frodo.wi.mit.edu/primer3/) y se optimizaron las condiciones de PCR. Se eligió la enzima de restricción DpnI (http://tools.neb.com/NEBcutter2/) de corte específico para el alelo mutado (Fermentas, ER1701). El patrón de corte obtenido se visualizó en agarosa 2% con BrEt en transiluminador UV. Se logró una técnica de detección de G820A en 3 días, como máximo, con infraestructura básica de un laboratorio de Biología Molecular. Se estableció los haplotipos de pedigrees completos aportando información para calcular el riesgo de repetición de la FL/P NS en la progenie de personas afectadas o no.