Efectos de la sobreexpresión de la Tripanotión sintetasa para Trypanosoma cruzi

MESIAS AC; PIÑEYRO MD; ROBELLO C; ZAGO MP

Salta

Jornada; XV Jornadas Académicas, de Investigación y de Extensión al Medio,; 2016

Universidad Nacional de Salta

T. cruzi es el agente etiológico de la enfermedad de Chagas. Este parásito posee una variedad de enzimas antioxidantes que le permiten tolerar el ataque del sistema inmune del huésped. La maquinaria antioxidante del parásito depende del tripanotión, una molécula análoga al glutatión humano cuya síntesis es catalizada por la Tripanotión Sintetasa (TryS), sobre esta enzima se centra este trabajo. Nuestro objetivo es caracterizar y comprender el rol que la Tripanotión sintetasa (TryS) desempeña en la homeóstasis redox propia del parásito, y a su vez la influencia que pueda tener en la relación entre el parásito y la célula huésped. Se obtuvieron parásitos sobreexpresantes TryS+ utilizando el vector pTREX. Para la realización del Western Blot se utilizaron extractos de epimastigotes y un anticuerpo obtenido en conejo. Los recuentos se realizaron en cámara de Neubauer. Los coeficientes de inhibición se obtuvieron mediante el programa Graphpad Prism v5. La metaciclogénesis se realizó mediante la adición de homogenado de vinchuca al 10%. Las infecciones se hicieron en células HL1 y para determinar los niveles intracelulares de especies reactivas del oxígeno, se utilizaron sondas detectadas mediante lector de fluorescencia.