"Efecto in vitro de serotonina sobre la actividad Na+K+ATPasa en branquias de Cyrtograpsus angulatus"

ELHALEM, L.M.; LOPEZ MAÑANES, A.A.

Rosario

Congreso; VII Congreso y XXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2005

Sociedad de Biología de Rosario

La Na+/K+ATPasa de branquias posteriores en cangrejos hiperreguladores juega un rol central en la ionorregulación siendo aún controvertido su rol en branquias anteriores. Sus mecanismos de regulación aún no han sido dilucidados. Las aminas biogénicas parecen regular la actividad Na+/K+ATPasa en branquias posteriores de algunas especies. Previamente, hemos demostrado la existencia de un efecto in vivo de serotonina sobre la actividad Na+/K+ATPasa en branquias anteriores de Cyrtograpsus angulatus de la Laguna de Mar Chiquita (Provincia de Bs. As.) en salinidad reducida. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto in vitro de serotonina sobre la actividad Na+/K+ATPasa en branquias anteriores y posteriores de C. angulatus en condiciones de salinidad reducida. Machos adultos recolectados en la Laguna de Mar Chiquita se aclimataron a 10‰ de salinidad. Secciones de tejido branquial se incubaron a 30º C en solución salina (NaCl 400 mM, KCl 10 mM, en buffer Imidazol 20 mM, pH 7,4) (2 ml de medio de incubación x 100 mg tejido-1) o en solución salina conteniendo serotonina 10-4 M ó 10-5 M. Luego de 15 minutos (´) ó de 60´ se separó el tejido. Los sobrenadantes de 10.000g de homogenatos de branquia anterior 4 (b4)  y posterior 6 (b6) se utilizaron como fuente de enzima (medio de homogeneización: sacarosa 0.25 M/EGTA-Tris 0.5 mM, pH 7.4). La actividad se determinó colorimétricamente midiendo la hidrólisis de ATP (5 mM) en presencia de (mM): Imidazol 20 (pH 7.4)/NaCl 100/KCl 30/EGTA 0.5 (Control: sin KCl + ouabaína 1). S[S1]  ss   e realizaron 3 experimentos independientes. Se realizó ANOVA como test estadístico (p<0.05). Luego de 15´ de incubación serotonina 10-4 M ó 10-5 M no produjo efecto sobre la actividad en b4 y b6. Serotonina 10-4 M produjo un aumento de la actividad Na+/K+ATPasa del 26 % en b6 luego de 60´., mientras que no tuvo efecto en b4. Los resultados muestran la acción directa de serotonina sobre b6 y una respuesta diferencial de la actividad Na+/K+ATPasa en branquias anteriores y posteriores lo que sugiere la existencia de mecanismos diferenciales de regulación mediados por esta amina biogénica en branquias individuales de este cangrejo.  [S1]