Análisis de la expresión de INGAP y REG3B. Dos miembros de la familia de proteínas Reg

RASCHIA MA; FLORES LE; MADRID VG; DEL ZOTTO HH; GAGLIARDINO JJ

La Plata

Congreso; Congreso Argentino de Fisiología 2009; 2009

Sociedad Argentina de Fisiología

 INGAP (Islet-Neogenesis-Associated-Protein) es una proteína del páncreas de hámster perteneciente a la familia Reg no encontrado en otras especies, y un pentadecapéptido del INGAP (INGAP-PP) reproduce el efecto biológico de la molécula intacta. Objetivo: Identificar INGAP o alguna proteína similar en páncreas de rata. Metodología: Analízamos la secuencia del ADNc y proteína del INGAP con los programas Blast y Clustal-W2. Determinamos la localización inmunohistoquímica del INGAP en páncreas de rata y hámster. Amplificamos y secuenciamos el ADNc insular y pancreático de ambas especies por RT-PCR utilizando cebadores específicos para INGAP (hámster), Reg3B (rata) y un tercer par (DegRI) capaz de reconocer ambos ADNc. Resultados: INGAP Y Reg3B mostraron una homología del 68% (ADNc) y 58.5% (proteína). Los cebadores de Reg3B y DegRI amplificaron en ambas especies mientras que los de INGAP sólo en hámster. El fragmento obtenido con los cebadores DegRI en rata presentó un 94% de homología con Reg3B y 64% con INGAP. En ambas especies detectamos (inmunohistoquímica), células insulares noB que se tiñeron con un anticuerpo de INGAP cuyo epitope antigénico presenta una homología del 84% entre INGAP y Reg313. Conclusión: Estos resultados y la alta homologia de INGAP-PP con Reg3B (85%) sugieren la coexistencia de ambas proteínas en el páncreas de hámster pero solo de Reg3B en la rata.