Actividad antimicrobiana del biosurfactante producido por Bacillus atrophaeus O9

NELDA LILA OLIVERA; MARISOL VALLEJO; ROGELIO MARGUET; CYNTHIA SEQUEIROS

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología, VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica (SADEBAC), I Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental (DiMAyA).; 2010

Asociación Argentina de Microbiología

Los biosurfactantes constituyen un grupo estructuralmente diverso de moléculas tensoactivas. En los últimos años ha crecido el interés por evaluar la utilidad de los biosurfactantes en las disciplinas médicas y veterinarias por sus propiedades antibacterianas, antimicóticas, antivirales e incluso antitumorales. Algunos biosurfactantes también han mostrado contrarrestar la adhesión y la formación de biofilms de microorganismos patógenos. El control de las enfermedades es uno de los mayores problemas en acuicultura, que genera altos costos en antibióticos, vacunas y procesos operativos. El objetivo del estudio fue analizar el potencial antimicrobiano del biosurfactante producido por la cepa marina Bacillus atrophaeus O9 contra bacterias patógenas de peces frecuentes en piscicultura. La cepa fue cultivada con sacarosa como fuente de carbono y el biosurfactante recuperado en forma de extracto crudo mediante precipitación en medio ácido del sobrenadante de los cultivos. La concentración de biosurfactante fue determinada midiendo la tensión superficial de diferentes diluciones del extracto con un tensiómetro de anillo. La Concentración Micelar Crítica (CMC) fue calculada del gráfico tensión superficial vs. concentración. La actividad antimicrobiana del biosurfactante se determinó por el método de difusión en placa midiendo el diámetro del halo de inhibición del crecimiento de los microorganismos patógenos antes y después de esterilizar (121ºC 15 min) el extracto con el biosurfactante. También se estudió el efecto de distintas concentraciones del biosurfactante sobre el crecimiento y la adhesión del patógeno Lactococcus garvieae. En el ensayo de adhesión se cultivó L. garvieae en tubos de vidrio donde la bacteria crece formando un biofilm adherido a las paredes del tubo en la interfase aire-agua; dicho biofilm fue tratado con concentraciones de biosurfactante entre 0,5 y 10 CMC. Las células que permanecieron adheridas fueron teñidas con cristal violeta, luego el colorante fue solubilizado y la absorbancia medida a 595 nm. El biosurfactante inhibió el crecimiento de los patógenos L. garvieae, Carnobacterium piscicola, Lactococcus piscium y Streptococcus iniae. Por el contrario, no mostró actividad contra Vibrio anguillarum, Yersinia ruckerii y Aeromonas salmonicida. El biosurfactante mantuvo su efecto inhibitorio sobre el crecimiento de L. garvieae hasta una concentración de aproximadamente 2 CMC. Se obtuvo el mismo resultado utilizando biosurfactante esterilizado lo que demuestra la elevada termoestabilidad del mismo. Por el contrario, el biosurfactante en ninguna de las concentraciones ensayadas favoreció la remoción de las células de L. garvieae adheridas a una superficie de vidrio. En general los biosurfactantes producidos por bacterias del género Bacillus son del tipo lipopeptídico variando de acuerdo a la cepa y las condiciones de cultivo. Los resultados obtenidos indican que el biosurfactante producido por B. atrophaeus O9 fue activo contra patógenos de peces Gram positivo por lo que podría ser una herramienta promisoria en su tratamiento.