Avaliação de parâmetros respiratórios em modelo de agressividade celular em melanoma humano

KEHL, C.; BRISTOT, I. J.; BRACALENTE, C.; HAAS, R.; IBAÑEZ, I. L.; MULLER, C. B.; DURÁN, H.; KLAMT, F.

San Pablo

Congreso; XXXII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental; 2017

Federação de Sociedades de Biologia Experimental, Brasil

Introdução:Melanoma é um dos tipos de câncer mais agressivo sendo altamente metastático, resistente a terapias, apresenta melanogênese disfuncional e grande produção de ERO (Espécies Reativas de Oxigênio). Estas características induzem alteração metabólica em vias de proliferação celular, diferenciação e invasão. Previamente, nosso grupo estabeleceu modelos celulares com diferentes graus de agressividade para estudo de melanomas (Oncotarget. 7(27):41154,2016). A partir da linhagem A375 foram obtidos dois clones: A7, cujos tumores induzidos em camundongos apresentaram crescimento normal, pigmentação e níveis constantes de H2O2; e G10, cujos tumores cresceram mais lentamente e mostraram-se metastáticos, com níveis aumentados de ERO, sendo mais agressivos (Oncotarget. 7(27):41142,2016). Uma das características cruciais para o estabelecimento do câncer é a reprogramação metabólica. Portanto, compreender como a reprogramação metabólica afeta a respiração celular, dentre outros quesitos, e sua relação com a agressividade é essencial.Objetivos:Analisar o metabolismo energético e correlacioná-lo com o nível de agressividade da linhagem celular A375 e suas derivadas PCDNA3, A7 e G10.Métodos:Cultivo celular: meio 50:50 DMEM/Ham’s F12 suplementado com ácido ascórbico, ácido pirúvico, galactose e insulina, a 37°C e 5% CO2 (PLoS ONE. 2012; 7: e44502). Utilizamos oximetria de alta resolução (OROBOROS®) para estabelecer parâmetros respiratórios. A dinâmica mitocondrial foi avaliada pela marcação com Mitotracker. Comparação dos dados por ANOVA de uma via seguido de Tukey, valores de p