INVESTIGADORES
IBARRA cristina Adriana
congresos y reuniones científicas
Título:
La Ouabaina protege la viabilidad de células endoteliales glomerulares renales humanas del efecto de las toxinas Shiga tipo 2 (Stx2) y Subtilasa (SubAB).
Autor/es:
GIRARD MAGALI; IBARRA CRISTINA; AMARAL MARÍA MARTA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Anual 2013 de la Sociedad Argentina de Fisiología, XLV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2013
Resumen:
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La
apoptosis de células endoteliales y epiteliales renales observada en biopsias
de pacientes que desarrollan Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) pone en
evidencia la citoxicidad de Stx2. Además, se postula que SubAB presente en
cepas de E. coli productor de Stx2 también contribuiría al desarrollo
del SUH. Previamente demostramos que Stx2 y SubAB disminuyen la viabilidad
celular e inducen apoptosis de cultivos primarios de células endoteliales
glomerulares humanas (HGEC). Recientemente, se propuso que la Ouabaina (OUA) protegería
a células epiteliales renales de rata de la apoptosis causada por la Stx2. El
objetivo de este trabajo fue estudiar si el pretratamiento con OUA disminuye la
citotoxicidad de Stx2 y de SubAB en células endoteliales y epiteliales humanas.
Para ello se utilizaron cultivos primarios de HGEC y las líneas celulares
modelo de epitelio renal humano (HK-2) y de mono (VERO). Las HGEC se aislaron
de fragmentos de riñones pediátricos provenientes de nefrectomías realizadas en
el Hospital Nacional ?Prof. Alejandro Posadas?. La viabilidad se determinó por incorporación
de rojo neutro. Las células VERO se incubaron con OUA (2,5 nM-100 nM) por 72 hs
para determinar la mínima concentración no citotóxica per se en ensayos de viabilidad celular. Luego, monocapas de VERO,
HGEC y HK-2 se pretrataron con OUA (5-30 nM) por 24 hs y a continuación se
incubaron con esas concentraciones de OUA en presencia de Stx2 (10-20 ng/ml) o
SubAB (100 ng/ml) por 48 hs. La protección máxima en la viabilidad celular se
obtuvo con 10 nM OUA para las células VERO (86 %, n= 5, p<0,05) y 20 nM OUA
para las HK-2 (72,5 %, n= 5, p<0,05) y HGEC (50,5 %, n= 4, p<0,05). Por
otra parte, 20 nM OUA protegió a las HGEC (89 %, n= 4, p<0,05) de la acción
citotóxica de la SubAB. Estos resultados indican que la Ouabaina es capaz de
proteger a las células renales del daño causado por Stx2 y SubAB y su uso podría
implementarse para prevenir la insuficiencia renal aguda observada en pacientes
con SUH.
