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IBARRA cristina Adriana

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Título:

Efecto de la toxina Shiga tipo 2 en la línea celular HK-2 modelo de epitelio tubular proximal renal humano. Acción de un inhibidor de la glucosilceramida sintasa.

Autor/es:

RIVERA FULTON; AMARAL MARÍA MARTA; ZOTTA ELSA; IBARRA CRISTINA

Lugar:

Mar del Plata

Reunión:

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2012

Resumen:

La forma típica del Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) asociado a E. coli productor de toxina Shiga tipo 2 (Stx2) constituye la principal causa pediátrica de insuficiencia renal aguda en Argentina. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de Stx2 en la línea celular HK-2 modelo de túbulo proximal renal humano; y eluso de Miglustat (MG, Zavesca), inhibidor de la glucosilceramida sintasa que cataliza la primera etapa de la síntesis del receptor globotriaosilceramida (Gb3) de Stx2 como estrategia de intervención. La viabilidad celular fue determinada mediante el ensayo de incorporación de rojo neutro en HK-2 incubada con 0.001 a 100 ng/ml de Stx2 (10 ng/ml) a 72 hs en HK-2 previamente incubada por 24 y 48 hs con distintas concentraciones de MG (50 a 500 µM). La morfología celular de HK-2 en presencia de de 500 µM de MG durante 48 hs y 10 ng/ml de Stx2 por 72 hs se evaluó por microscopía óptica luego de la tinción con hematoxilina eosina. Los resultados muestran que Stx2 produjo un ainhibición de la viabilidad de HK-2 de manera dosis y tiempo dependiente. La DC50 fue de 10 ng/ml de Stx2 y causó una inhibición de 52,2 ± 1,4% (n=3) a las 72 hs de incubación. Esta inhibición fue significativamente menor /p<0,01, n=3) cuando HK-2 fue previamente incubada con 500 µM MG por 24 hs (40,2 ± 1,9%). El MG no afectó la viabilidad de HK-2 en las distintas concentraciones ensayadas (98,4 ± 1,8%, 500 µM MG). Por otra parte, las alteraciones de la morfología celular causada por Stx2 fueron menores en presencia de MG. Nuestros resultados muestran que Stx2 tiene un efecto citotóxico en la línea celular HK-2 dependiente del receptor Gb3 y que MG fue capaz de neutralizar parcialmente los efectos citotóxicos de Stx2.

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