Acción citotóxica de E. coli O113;H21 que expresa toxina Shiga tipo 2 y subtilasa en colon humano in vitro. Comparación de cepas salvajes y mutadas.

GERHARDT ELIZABETH; MASSÓ MARIANA; MOREIRA ALEJANDRO; ZOTTA ELSA; IBARRA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

@font-face { font-family: "Arial"; }p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal { margin: 0cm 0cm 0.0001pt; font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman"; }div.Section1 { page: Section1; } Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es una causa importante de enfermedad gastrointestinal en humanos. Estas infecciones pueden resultar en complicaciones sistémicas conocidas como Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) causadas por las toxinas Shiga (Stx1, Stx2 y sus variantes) producidas por cepas STEC O157 y no O157. El 70% de los casos de SUH son producidos por cepas STEC O157:H7 y el resto por otros serotipos como el O113:H21 que produce Stx2 y subtilasa (SubAB). Se evaluó la acción citotóxica de cepas de STEC O113:H21 aislada de casos de SUH en Argentina (370/02, Marta Rivas, ANLIS- Malbrán) y en Australia (98NK2, James Paton, Universidad de Adelaida, Australia) y se comparó con los efectos obtenidos con STEC 98NK2 mutada en Stx2 (98NK2∆stx2) o en SubAB (98NK2∆subAB). La mucosa colónica se montó en una cámara de Ussing y el flujo neto absortivo de agua (Jw) y la corriente de cortocircuito (Isc) se registraron simultáneamente. Al final del experimento, los tejidos se procesaron para microscopía óptica. La incubación del lado mucoso del tejido con 200 µl de STEC 370/02 o 98NK2 inhibió significativamente el Jw y produjo un aumento de Isc. La inhibición del Jw es consecuencia de la acción de ambas toxinas ya que las cepas mutadas 98NK2∆stx2 y 98NK2∆subAB inhibieron el Jw en aprox un 40% y 90% respectivamente. Los cambios en Isc fueron consecuencia de la presencia de la bacteria más que de las toxinas ya que Stx2 y SubAB pura inhiben el Jw y no alteran la Isc. La observación microscópica mostró que SubAB pura y la cepa 98NK2∆stx2 producen destrucción del epitelio superficial mientras que la cepa 98NK2∆subAB produce necrosis del tercio superior de las criptas y focos hemorrágicos. Las cepas salvajes STEC 370/02 y 98NK2 presentan una severa necrosis de superficie y criptas. Este es el primer trabajo que demuestra la contribución de SubAB a la alteración en la funcionalidad e integridad del colon humano que produce la infección por STEC O113:H21.