Caracterización de la acción citotóxica de Stx2B sobre la absorción de iones y agua

LEVI L, PISTONE CREYDT V, ZOTTA E, IBARRA C

Mar del Plata

Congreso; 1er Congreso Conjunto de las Sociedades Biomédicas.; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

E.coli enterohemorrágicas (EHEC) productora de toxina Shiga (Stx) coloniza el colon humano y causa diarrea acuosa, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. En resultados previos observamos que Stx2 es capaz de inhibir la absorción neta de agua (Jw) del colon humano sin alterar la corriente de cortocircuito (Isc) luego de 1h de incubación de una manera dosis y tiempo dependiente. Paralelamente, daña la superficie de la mucosa y un tercio superior de la cripta colónica (Fiorito et al. Dig. Dis. Sc. 45,480, 2000). Recientemente se demostró que la subunidad B de Stx2 (Stx2B) también inhibe el transporte de agua a través del epitelio colónico pero no produce daño histológico (Pistone et al. Braz. Jour. Med. Biol. Res. 37,799, 2004). El objetivo de nuestro trabajo fue estudiar la inhibición de Jw producida por Stx2B para conocer como contribuye esta subunidad a la fisiopatología de la diarrea acuosa observada en los pacientes infectados con EHEC. Para ello, fragmentos de mucosa colónica humana se montaron en una cámara de Ussing modificada y se registraron simultáneamente Jw e Isc, en ausencia y presencia de amiloride seguido de incubación con Stx2B. La preincubación con 10-3 M amiloride produjo una significativa disminución de Jw y aumento de Isc en los primeros 30 min de incubación. El agregado posterior de 300 ng/ml Stx2B no modificó significativamente los parámetros medidos. En ausencia de amiloride, 300 ng/ml Stx2 B inhibe el Jw sin modificar la Isc. Estos resultados sugieren que el mecanismo de acción de Stx2B sobre el Jw es dependiente de un movimiento de Na+ no electrogénico amiloride sensible. El intercambiador neutro Na+-H+/Cl--CO3H- amiloride sensible descripto en la superficie del colon humano podría entonces estar inhibido por Stx2B y ser responsable de la inhibición del flujo de agua producido por la subunidad B.