INVESTIGADORES
FERRONI felix martin
congresos y reuniones científicas
Título:
EXPRESIÓN HETERÓLOGA, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE UNA NITRITO REDUCTASA DE COBRE DERIVADA DE LA BACTERIA TERMOTOLERANTE THERMUS SCOTODUCTUS SA-01
Autor/es:
FLORENCIA BELÉN SCHMIDT; CARLOS DANTE BRONDINO; FELIX M. FERRONI
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Encuentro; XXI Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral; 2017
Institución organizadora:
Universidad Nacional del Litoral
Resumen:
El nitrato se reduce vía nitrito, a óxido nítrico, luego a monóxido de nitrógeno y finalmente a nitrógeno molecular. Esta vía metabólica también conocida como respiración de nitratos, conserva la energía la cual se almacena como ATP (Kraft y col., 2011). La enzima que cataliza el segundo paso en la cascada de reducción es la nitrito reductasa (Nir) (Zumft, 1997). Se han reportado dos tipos de Nirs que intervienen en el proceso de desnitrificación: i) Nir de cobre (NirK) y ii) un complejo citocromo cd1 denominado NirS (Zumft, 1997; Kraft y col., 2011). La presencia de ambas Nirs en el mismo microorganismo no era común hasta que se reportó el genoma de Thermus scotoductus SA-01 (Gounder y col., 2011), una bacteria termotolerante aislada de una fisura de agua a 3,2 km de la superficie en territorio sudafricano. En nuestro laboratorio nos propusimos estudiar Nirs que provengan de extremófilos y que puedan utilizarse para el desarrollo de biosensores robustos para nitrito en muestras de diverso origen. Aquí presentamos la expresión heteróloga de NirK de T. scotoductus SA-01 (TsNirK) en Escherichia coli, la purificación y caracterización preliminar de la proteína recombinante.Gounder K., Brzuszkiewicz E., Liesegang H., Wollherr A., Daniel R., Gottschalk G., Reva O., Kumwenda B., Srivastava M., Bricio C, Berenguer J., van Heerden E., Litthauer D. 2011.BMC Genomics, 12, 577.Kraft B., Strous M., Tegetmeyer H.E., 2011.J. Biotechnol., 155, 104-117. Zumft, W.G.,1997Mol. Biol. Rev., 61, 533-616.